Azonosító szám: TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011
KLINIKAI KIPRÓBÁLÁS (3)
a Pécsi Tudományegyetemen és a Debreceni Egyetemen
Azonosító szám: TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011
Dr. Pongrácz Judit
Háromdimenziós szövettenyésztés és „tissue engineering”- 25. Előadás
vérerek (TEBV)
• TE útján előállított vérerek az alacsony nyomású tüdő keringésben használatosak
• Az ilyen vénák nem elég ellenállóak ahhoz, hogy az arteriális nyomásnak ellenálljanak
Kisvénák kivétele
Sejtek polimerre növesztése Sejtek izolálása
Sejtek felszaporítása
Tissue-engineering útján készült graft
TEBV előállítása
• Teljesen biológiai módon, tissue-engineered humán véredények (Nicolas L'heureux, Stéphanie Pâquet, Raymond Labbé, Lucie Germain, and François A.
Auger) FASEB Journal 1998
• HUVEC-t és SMC-t használtak
Miokardiális infarktus
• Őssejteket használnak olyan esetben, amikor nagy területet érint a károsodás
• A legtöbb esetben javulás mutatkozik, de további vizsgálatokra van szükség
Húgyvezeték és húgyhólyag
• Sejtmentes, kollagén-alapú mátrixok
• Bélből vagy húgyhólyagból származó epitéliális sejtek
• 4-7 évvel később 40 betegből 34 betegnél javulás volt észlelhető
Porc
• Eddig két, többközpontú klinikai kipróbálás történt
• A legtöbb esetben javulást tapasztaltak
• Hosszú távú hatások még feldolgozás alatt állnak
Tüdő
Trachea - bronchusok - tüdő
Tüdőbetegségek, amelyekre a sejtes terápiák jótékony hatással lehetnek
• COPD (chronic obstuctive pulmonary disease)
• ARDS (acute respiratory distress syndrome)
• Asztma
• Mechanikai szöveti károsodás
Stratégiák sejtalapú tüdő terápiákhoz
Tüdő epithéliumszerű sejtek Embrionális őssejtek
Sejtkultúra Szelekció
(genetikai, levegő-folyadék határ, medium ko-kultúra)
Epithélium Ér
Stroma (fibroblaszt)
ESC-k, MSC-k, Fibrociták
Akut sejtvédelem/javítás (túlélési, növekedési faktorok)
Porc Tracheán belüli/Vaszkuláris infúzió
Szerkezeti graft
Engraftment Géntranszfer
Terápiás molekulák bevitele Engraftment
Organoid Funkcióképes egység Endotélium
Tüdő epitélium
Mezenchima
A tüdő komplex struktúráinak kifejlődése egérben
Hengeres sejt
Fibroblasztok
Goblet sejt
Bazális sejt
Csillós sejt Clara sejt I –es típusú
sejt
II-es típusú
sejt
I.
Embrionális E 9-12
II.
Pszeudoglanduláris E 12-15
III.
Canaliculáris E 15-E17
IV.
Sacculáris E 17-Születésig (Sz)
V.
Alveoláris Sz-Sz. után 20 nap
Tüdő rügy
Es Es
T T
KUTATÁSBAN VALÓ
FELHASZNÁLÁS, DROG TESZTELÉS
Azonosító szám: TÁMOP-4.1.2-08/1/A-2009-0011
Dr. Pongrácz Judit
Háromdimenziós szövettenyésztés és „tissue engineering” – 26. Előadás
Kutatási felhasználás
• Sejtek közötti interakció
• Jelátvitel útvonalak vizsgálata (inter- és intra- celluláris)
• Regenerációs folyamatok vizsgálata
• Betegségek modellezése
Tímusz reaggregáció
E15 egér embrió
T-limfociták vagy limfoid progenitorok
Deoxiguanozinnal kezelt kultúrák
Tímusz epitéliális sejtek E15 tímusz lebenyek
Reaggregátum
Notch jelátvitel vizsgálata tímusz kultúrákban
Intracelluláris Notch (ICN)
• Nincs T-sejt irányú elköteleződés
• B-sejt irányú elköteleződés
• T-sejt irányú elköteleződés
• B-sejt irányú elköteleződés gátolt
Sejtmag Stroma sejt
Limfocita progenitor
Jagged/Delta-like
CSL CSL
KoR KoA
Presenilin g-Szekretáz
KoR
(ICN)
Nyálmirigy aggregátum
GFP-Ad FoxN1-Ad
Szövetspecifikus változások
• Transzkripciós faktorok és más gének expressziója könnyen módosítható
• A génexpresszió módosulások szövettípushoz kötöttek
• A teljes szövetre kifejtett hatásokat morfológiai, sejt interakció és jelátvitel szintjén lehet vizsgálni
Drog tesztelés
• Toxicitás tesztek
• Hatékonyság tesztek
Máj toxicitási tesztek
• Tisztított primer humán májsejtek 2D kultúrában
• Komplex, 3D máj mikroszövetkék
• Toxicitási vizsgálatok (akut és krónikus)
• Viabilitási vizsgálatok
• Epe termelés
• Molekuláris markerek tesztelése (albumin stb.)
Drog tesztelés tüdőmodellen
• Komplex sejt összetétel
• Fiziológiáshoz közeli drog transzporter expresszió
• Reprodukálhatóság
• Akalmas HTS-re
