6. MEGBESZÉLÉS ÉS JAVASLATOK
6.1. E GYEDILEG KEZELT CSOPORTOK
A kontroll csoportban a testtömegek átlaga 34,3 g volt, a szórás ±2,60 (13. ábra, 17. táblázat).
Réz-szulfát
A 0,01%-os réz-szulfáttal elvégzett bemerítéses kezelés szignifikánsan (p<0,05) csökkentette az embriók testtömegét a kontroll csoportban mért értékekhez képest (13.
ábra, 17. táblázat).
Kadmium-szulfát
A 0,01%-os kadmium-szulfát hatására szignifikánsan csökkent az embriók testtömege a kontroll csoporthoz viszonyítva (p<0,05) (13. ábra, 17. táblázat).
Ólom-acetát
A 0,01%-os ólom-acetát hatására szignifikáns mértékben csökkent az embriók testtömege a kontroll csoporthoz viszonyítva (p<0,05) (13. ábra, 17. táblázat).
Dikamin D
A gyakorlati permetlé töménységben felhasznált Dikamin D hatásaként bekövetkezett testtömeg-csökkenés a kontroll csoportban mért testtömeg-átlaghoz viszonyítva statisztikailag igazoltnak bizonyult (p<0,05) (13. ábra, 17. táblázat).
Stomp 330 EC
A Stomp 330 EC herbiciddel végzett bemerítés hatására szignifikáns testtömeg-csökkenést (p<0,05) tapasztaltam a kontroll csoportban mért értékhez képest (13. ábra, 17.
táblázat).
113 5.2.6.2. Kombináltan kezelt csoportok
Réz-szulfát + Dikamin D
A réz-szulfát és a Dikamin D együttes alkalmazásakor a kontroll csoporthoz képest szignifikáns mértékű testtömeg-csökkenés jelentkezett (p<0,05), míg az egyedileg kezelt csoportokhoz képest nem tapasztaltam szignifikáns testtömeg-csökkenést (13. ábra, 17.
táblázat).
Réz-szulfát + Stomp 330 EC
A keltetés megkezdésének napján elvégzett bemerítéses expozíció hatásaként a kezelt embriók testtömege szignifikáns módon csökkent a kontroll csoporthoz képest (p<0,05), míg az egyedileg kezelt csoportokhoz viszonyítva nem tapasztaltam statisztikailag igazolható testtömeg-csökkenést (13. ábra, 17. táblázat).
Kadmium-szulfát + Dikamin D
A kombinált kezelés hatásaként a statisztikai vizsgálat szignifikáns mértékű (p<0,05) testtömeg-csökkenést igazolt a kontroll és a nehézfémmel egyedileg kezelt csoportokhoz képest, míg a herbiciddel egyedileg kezelt csoporthoz viszonyítva nem jelentkezett szignifikáns testtömeg-csökkenés (13. ábra, 17. táblázat).
Kadmium-szulfát + Stomp 330 EC
A kadmium-szulfát és a Stomp 330 EC együttes felhasználása csökkentette az embriók testtömegét a kontroll és a nehézfémmel egyedileg kezelt csoportokhoz viszonyítva, de ez az eltérés statisztikai vizsgálattal nem volt igazolható (13. ábra, 17.
táblázat).
Ólom-acetát + Dikamin D
A kombinált kezelés hatásaként a statisztikai vizsgálat szignifikáns mértékű (p<0,05) testtömeg-csökkenést igazolt mind a kontroll, mind a nehézfémmel egyedileg kezelt csoportokhoz képest, míg a herbiciddel egyedileg kezelt csoporthoz viszonyítva nem tapasztaltam szignifikáns testtömeg-csökkenést (13. ábra, 17. táblázat).
114 Ólom-acetát + Stomp 330 EC
Az ólom-acetát és a Stomp 330 EC együttes felhasználása szignifikánsan csökkentette az embriók testtömegét mind a kontroll, mind pedig a nehézfémmel egyedileg kezelt csoportokhoz viszonyítva (p<0,05), míg a herbiciddel egyedileg kezelt csoporthoz viszonyítva nem tapasztaltam szignifikáns testtömeg-csökkenést (13. ábra, 17. táblázat).
Az injektálásos és a bemerítéses kezelési mód összehasonlításából megállapítható, hogy a provokatívabb injektálásos kezelés hatásaként nagyobb mértékben csökkent az embriók testtömege, mint a bemerítéses kezelés során.
13. ábra Embrionális testtömeg-átlagok alakulása a kísérletbe vont növényvédő szerek és nehézfémek egyedi és együttes méreghatásának vizsgálata során (0. napi
bemerítéses kezelés)
115
17. táblázat Embrionális testtömegek átlaga (0. napi bemerítéses kezelés, 19. napi feldolgozás)
Kezelés Átlagtömeg (g) Szórás (±)
Kontroll 34,3 2,60
Réz-szulfát 29,2a 3,72
Kadmium-szulfát 32,2a 2,92
Ólom-acetát 32,4a 3,91
Dikamin D 25,3a 3,72
Stomp 330 EC 28,7a 2,48
Réz-szulfát + Dikamin D 30,5a 3,38
Réz-szulfát + Stomp 330 EC 29,8a 4,69
Kadmium-szulfát + Dikamin D 27,4a, b 1,69
Kadmium-szulfát + Stomp 330 EC 34,1 2,53
Ólom-acetát + Dikamin D 30,2a, c 3,31
Ólom-acetát + Stomp 330 EC 28,6a, c 3,55
aSzignifikáns eltérés a kontroll csoporthoz viszonyítva (p<0,05)
bSzignifikáns eltérés a kadmium-szulfáttal kezelt csoporthoz viszonyítva (p<0,05)
cSzignifikáns eltérés az ólom-acetáttal kezelt csoporthoz viszonyítva (p<0,05)
116
5.2.7. Csontvázfestéssel történő feldolgozás eredménye az injektálásos kezelésnél
5.2.7.1. Egyedileg kezelt csoportok Kontroll
A csoportban csontvázfestéssel kimutatható fejlődési rendellenességet két embrió esetében találtam (20%). Fejlődési anomáliaként egy esetben törpenövekedés, egy esetben pedig görbült nyak jelentkezett (18-19. táblázat, 14. ábra).
14. ábra Csontvázfestett kontroll házityúk embrió a keltetés 19. napján (injektálásos kezelés)
Réz-szulfát
A 0,01%-os réz-szulfáttal egyedileg kezelt csoportban három esetben diagnosztizáltam fejlődési rendellenességet (30%), amely növekedési retardációban és a láb hibás állásában nyilvánult meg (18-19. táblázat).
Kadmium-szulfát
A 0,01%-os koncentrációban felhasznált kadmium-szulfát hatásaként a kontroll csoporthoz hasonlóan két esetben találtam fejlődési rendellenességet mutató embriót (20%). Egy esetben a nyak rendellenes görbülete, míg a másik embrió esetében fejlődésbeli elmaradás jelentkezett (18-19. táblázat).
117 Ólom-acetát
A 0,01%-os koncentrációban felhasznált ólom-acetát hatásaként két esetben találtam fejlődési rendellenességet mutató embriót (20%). Egy esetben a láb rendellenes állása, míg a másik embrió esetében növekedésbeli elmaradás jelentkezett (18-19.
táblázat).
Dikamin D
A gyakorlati permetlé töménységben felhasznált Dikamin D injektálása négy embriónál okozott fejlődési eltérést (40%), amely növekedési retardációban, valamint a nyak görbülésében nyilvánult meg (18-19. táblázat).
Stomp 330 EC
A 33% pendimetalin hatóanyag tartalmú Stomp 330 EC hatásaként három embriónál jelentkezett fejlődésbeli zavar (30%), amely részleteiben tekintve növekedési retardációt, az ujjak deformációját és a nyak enyhe görbületét jelentette (18-19. táblázat).
5.2.7.2. Kombináltan kezelt csoportok Réz-szulfát + Dikamin D
A réz-szulfáttal és a Dikamin D-vel együttesen kezelt csoportban két esetben törpenövekedést, két esetben pedig a nyak rendellenes állását (görbült nyak) tapasztaltam (40%) (18-19. táblázat).
Réz-szulfát + Stomp 330
A csontvázpreparátumok sztereomikroszkópos értékelése során a csoportban négy rendellenes fejlődésű embriót találtam (40%). Rendellenességként növekedési retardáció, valamint rendellenes lábállás jelentkezett, amely a végtag csavarodásában nyilvánult meg (18-19. táblázat, 15. ábra).
118
15. ábra Réz-szulfáttal és Stomp 330 EC-vel (növekedési retardáció) együttesen kezelt csontvázfestett házityúkembrió kontroll embrióval összehasonlítva a keltetés 19.
napján
Kadmium-szulfát + Dikamin D
A kadmium-szulfáttal és a Dikamin D-vel való együttes kezelés eredményeként négy embriónál állapítottam meg fejlődésbeli eltérést (40%), amely három esetben növekedési retardációban, valamint egy embriónál a nyak rendellenes állásában (görbült nyak) nyilvánult meg (18-19. táblázat).
Kadmium-szulfát + Stomp 330 EC
A kadmium-szulfáttal és a Stomp 330 EC-vel történt kezelés három embrió esetében eredményezett fejlődésbeli zavart (30%). Növekedési retardációt, valamint a nyak és a láb rendellenes állását tapasztaltam (18-19. táblázat, 16. ábra).
119
16. ábra Kadmium-szulfáttal és Stomp 330 EC-vel együttesen kezelt csontvázfestett házityúkembrió a keltetés 19. napján (görbült nyak, hibás láb)
Ólom-acetát + Dikamin D
Az ólom-acetáttal és a herbiciddel együttesen kezelt csoportban négy rendellenességet mutató embriót találtam (40%). A rendellenességek jellemzően görbült nyak, a láb hibás állása és növekedési retardáció voltak (18-19. táblázat).
Ólom-acetát + Stomp 330 EC
A nehézfémmel és a herbiciddel együttesen kezelt csoportban három fejlődési rendellenességgel bíró embriót találtam (30%), amelyeknél a nyak enyhe görbülete és a láb hibája jelentkezett (18-19. táblázat).
120
18. táblázat Csontvázfestéssel feltárt fejlődési rendellenességek a kísérletbe vont nehézfémek és növényvédő szerek egyedi és együttes méreghatásának vizsgálata
során (0. napi injektálásos kezelés)
Kezelt csoportok
Rendellenes fejlődésű embriók száma (db)/vizsgált
embriók száma (db)
Rendellenes fejlődésű embriók
aránya (%)
Kontroll 2/10 20
Réz-szulfát 3/10 30
Kadmium-szulfát 2/10 20
Ólom-acetát 2/10 20
Dikamin D 4/10 40
Stomp 330 EC 3/10 30
Réz-szulfát + Dikamin D 4/10 40
Réz-szulfát + Stomp 330 EC 4/10 40
Kadmium-szulfát + Dikamin D 4/10 40
Kadmium-szulfát + Stomp 330
EC 3/10 30
Ólom-acetát + Dikamin D 4/10 40
Ólom-acetát + Stomp 330 EC 3/10 30
121
19. táblázat A csontvázfestési eljárás során feltárt fejlődési rendellenességek típusai (0. napi injektálásos kezelés, 19. napi feldolgozás)
Kezelt csoportok Fejlődési rendellenességek típusai (esetszám) Kontroll Enyhén görbült nyak (1), Növekedési retardáció (1) Réz-szulfát Hibás láb (1), Növekedési retardáció (2) Kadmium-szulfát Enyhén görbült nyak (1), Növekedési retardáció (1) Ólom-acetát Hibás láb (1), Növekedési retardáció (1) Dikamin D Görbült nyak (3), Növekedési retardáció (1) Stomp 330 EC Enyhén görbült nyak (1), Hibás láb (1)
Növekedési retardáció (1)
Réz-szulfát + Dikamin D Görbült nyak (2)
Növekedési retardáció (2) Réz-szulfát + Stomp 330 EC Hibás (csavarodott) láb (1)
Növekedési retardáció (3) Kadmium-szulfát + Dikamin
D
Enyhén görbült nyak (1) Növekedési retardáció (3) Kadmium-szulfát + Stomp
330 EC
Enyhén görbült nyak és hibás láb (1) Növekedési retardáció (2) Ólom-acetát + Dikamin D Görbült nyak (2), Hibás láb (1)
Növekedési retardáció (1) Ólom-acetát + Stomp 330 EC Enyhén görbült nyak (2), Hibás láb (1)
122
5.2.8. Csontvázfestéssel történő feldolgozás eredménye a bemerítéses kezelésnél
5.2.8.1. Egyedileg kezelt csoportok Kontroll
A csoportban csontvázfestéssel kimutatható fejlődési rendellenességet egy embrió esetében találtam. Fejlődési anomáliaként enyhén görbült nyak jelentkezett (20-21.
táblázat).
Réz-szulfát
A 0,01%-os réz-szulfáttal egyedileg kezelt csoportban két esetben diagnosztizáltam fejlődési rendellenességet (20%), amely a láb hibás állásában nyilvánult meg (20-21.
táblázat).
Kadmium-szulfát
A 0,01%-os koncentrációban felhasznált kadmium-szulfát hatásaként egy esetben találtam fejlődési rendellenességet mutató embriót (10%), ahol a nyak enyhe görbülete jelentkezett (20-21. táblázat).
Ólom-acetát
A 0,01%-os koncentrációban felhasznált ólom-acetát hatásaként két esetben találtam fejlődési rendellenességet mutató embriót (20%). Egy esetben a láb rendellenes állása, míg a másik embrió esetében a nyak enyhe görbülete jelentkezett (20-21. táblázat).
Dikamin D
A gyakorlati permetlé töménységben felhasznált Dikamin D injektálása három embriónál okozott fejlődési eltérést (30%), amely két esetben a nyak görbülésében, valamint egy esetben a lábak hibás állásában nyilvánult meg (20-21. táblázat).
123 Stomp 330 EC
A 33% pendimetalin hatóanyag tartalmú Stomp 330 EC hatásaként egy embriónál jelentkezett fejlődésbeli zavar (10%), amely a nyak enyhe görbületét jelentette (20-21.
táblázat).
5.2.8.2. Kombináltan kezelt csoportok Réz-szulfát + Dikamin D
A réz-szulfáttal és a Dikamin D-vel együttesen kezelt csoportban egy esetben a lábak, valamint két esetben a nyak rendellenes állását (görbült nyak) tapasztaltam (30%) (20-21. táblázat, 17. ábra).
17. ábra Réz-szulfáttal és Dikamin D-vel együttesen kezelt embrió a keltetés 19.
napján (görbült nyak)
Réz-szulfát + Stomp 330
A csontvázpreparátumok sztereomikroszkópos értékelése során a csoportban két rendellenes fejlődésű embriót találtam (20%). Rendellenességként mindkét esetben hibás lábállás jelentkezett, amely a végtag csavarodásában nyilvánult meg (20-21. táblázat, 18.
ábra).
124
18. ábra Réz-szulfáttal és Stomp 330 EC-vel együttesen kezelt embrió a keltetés 19.
napján (hibás láb, az ujjak deformációja)
Kadmium-szulfát + Dikamin D
A kadmium-szulfáttal és a Dikamin D-vel való együttes kezelés eredményeként három embriónál állapítottam meg fejlődésbeli eltérést (30%), amely két esetben a nyak enyhe görbületében, egy esetben pedig lábhiba előfordulásában nyilvánult meg (20-21.
táblázat).
Kadmium-szulfát + Stomp 330 EC
A kadmium-szulfáttal és a Stomp 330 EC-vel történt kezelés két embrió esetében eredményezett fejlődésbeli zavart (20%). Mindkét esetben a nyak rendellenes állását tapasztaltam (20-21. táblázat).
Ólom-acetát + Dikamin D
Az ólom-acetáttal és a herbiciddel együttesen kezelt csoportban három rendellenességet mutató embriót találtam (30%). A rendellenességek jellemzően görbült nyak és a láb hibás állása voltak (20-21. táblázat).
125 Ólom-acetát + Stomp 330 EC
A nehézfémmel és a herbiciddel együttesen kezelt csoportban egy fejlődési rendellenességgel bíró embriót találtam (10%), amelynél a nyak enyhe görbülete jelentkezett (20-21. táblázat).
A kétféle kezelési módszer összehasonlításával megállapítható, hogy a kevésbé provokatív bemerítéses kezelés esetében kevesebb csontvázfestéssel kimutatható fejlődési rendellenességet tapasztaltam.
20. táblázat Csontvázfestéssel feltárt fejlődési rendellenességek a kísérletbe vont nehézfémek és növényvédő szerek egyedi és együttes méreghatásának vizsgálata
során (0. napi bemerítéses kezelés)
126
21. táblázat A csontvázfestési eljárás során feltárt fejlődési rendellenességek típusai (0. napi bemerítéses kezelés, 19. napi feldolgozás)
Kezelt csoportok Fejlődési rendellenességek típusai (esetszám)
Kontroll Enyhén görbült nyak (1)
Réz-szulfát Hibás láb (2)
Kadmium-szulfát Enyhén görbült nyak (1)
Ólom-acetát Hibás láb (1), Enyhén görbült nyak (1)
Dikamin D Görbült nyak (2), Hibás láb (1)
Stomp 330 EC Enyhén görbült nyak (1)
Réz-szulfát + Dikamin D Görbült nyak (2)
Hibás láb (1)
Réz-szulfát + Stomp 330 EC Hibás láb (2)
Kadmium-szulfát + Dikamin D Enyhén görbült nyak (2) Hibás láb (1) Kadmium-szulfát + Stomp 330 EC Enyhén görbült nyak (2)
Ólom-acetát + Dikamin D Görbült nyak (2)
Hibás láb (1) Ólom-acetát + Stomp 330 EC Enyhén görbült nyak (1)
127
5.2.9. A szövettani feldolgozás eredménye injektálásos és bemerítéses kezelésnél
5.2.9.1. Egyedileg kezelt csoportok Kontroll
A nyakizomban mind az injektálásos kezelés, mind a bemerítés eredményeként a miofibrillumok jól elkülönültek, a sejtmagok jól festődtek, a vizsgált izomrostok épek. A máj szerkezete ép, a sejthatárok jól láthatók, a kettős májsejtsorok elkülönülnek. A hepatociták magja ép, a sinusoidok közepes tágasságúak. A májsejtek citoplazmáját sok vakuolum tölti ki (19. ábra).
19. ábra Kontroll házityúkembrióból származó májszövet (H-E festés, 400 x nagyítás)
Réz-szulfát
A 0,01%-os réz-szulfáttal egyedileg kezelt embriók nyakizom és máj mintái nem tértek el a kontrolltól szövettanilag egyik kezelési mód esetében sem.
128 Kadmium-szulfát
A kontroll csoporthoz viszonyítva patológiás eltérést nem állapítottam meg a 0,01%-os kadmium-szulfáttal egyedileg kezelt csoportban sem az injektálásos, sem a bemerítéses kezelés során.
Ólom-acetát
A 0,01%-os ólom-acetáttal egyedileg kezelt csoportban a kontrollhoz viszonyítva szövettani vizsgálattal kimutatható eltérés nem jelentkezett egyik kezelési mód esetében sem.
Dikamin D
A gyakorlati permetlé töménységben alkalmazott Dikamin D-vel kezelt csoportban sem az injektálásos, sem a bemerítéses kezelés eredményeként szövettani vizsgálattal kimutatható kóros eltérést nem találtam a nyakizom és máj metszetek értékelése során.
Stomp 330 EC
A gyakorlati permetlé töménységben alkalmazott herbiciddel egyedileg kezelt állatok nyakizom és máj mintái nem tértek el a kontrolltól egyik kezelési módnál sem.
5.2.9.2. Kombináltan kezelt csoportok Réz-szulfát + Dikamin D
A réz-szulfáttal és a Dikamin D-vel együttesen kezelt embriók szövettanilag értékelt nyakizom és máj mintái nem tértek el a kontrolltól egyik kezelési mód alkalmazása esetén sem.
Réz-szulfát + Stomp 330 EC
Az együttesen kezelt csoportban a nyakizom és a máj metszetek értékelésekor szövettani vizsgálattal kimutatható eltérést nem találtam egyik kezelési mód esetében sem.
Kadmium-szulfát + Dikamin D
A kadmium-szulfáttal és a Dikamin D-vel kezelt embriók nyakizom és máj mintái egyik kezelési mód esetében sem tértek el szövettanilag a kontroll csoporttól.
129 Kadmium-szulfát + Stomp 330 EC
A kombinált kezelés eredményeként a kontroll csoporthoz viszonyítva patológiás eltérést sem az injektálással, sem a bemerítéssel elvégzett kezelésnél nem tapasztaltam.
Ólom-acetát + Dikamin D
A kadmium-szulfáttal és a Dikamin D-vel kezelt embriók nyakizom és máj mintái nem tértek el szövettanilag a kontroll csoporttól egyik kezelési mód alkalmazása esetén sem.
Ólom-acetát + Stomp 330 EC
A kombinált kezelés eredményeként a kontroll csoporthoz viszonyítva patológiás eltérést nem tapasztaltam sem az injektálással, sem a bemerítéssel elvégzett kezelésnél.
130
6. Megbeszélés és javaslatok 6.1. Egyedileg kezelt csoportok
Réz-szulfát
A 0,01%-os koncentrációban alkalmazott réz-szulfát embriótoxikusnak bizonyult, az embrióra nézve káros hatásai a 19. napi feldolgozás adatai alapján a kontroll csoporthoz viszonyított szignifikáns testtömeg-csökkenésben és a fejlődési rendellenességek számának szintén szignifikáns mértékű növekedésében nyilvánultak meg mindkét kezelési módszer alkalmazása esetében.
A korábban FEJES (2005) által elvégzett dóziskereső vizsgálatok során a saját eredményeimhez hasonlóan szignifikáns testtömeg-csökkenés jelentkezett a 0,01%-os koncentrációban a tojásba injektált réz-szulfát hatására, de a fejlődési rendellenességek száma nem emelkedett szignifikáns mértékben a kontroll csoporthoz viszonyítva.
Kadmium-szulfát
A 0,01%-os koncentrációban alkalmazott kadmium-szulfát embriótoxikusnak bizonyult, az embrióra nézve káros hatásai a 19. napi feldolgozás adatai alapján a kontroll csoporthoz viszonyított szignifikáns testtömeg-csökkenésben, a fejlődési rendellenességek előfordulási gyakoriságának kontrollhoz viszonyított növekedésében, valamint az elhalások számának fokozódásában nyilvánultak meg mindkét kezelési mód esetében.
A korábban FEJES (2005) által elvégzett dóziskereső vizsgálatok során a 0,01%-os koncentrációban a tojásba injektált kadmium-szulfát nem okozott szignifikáns testtömeg-csökkenést a kontroll csoporthoz viszonyítva, de az embrióelhalások száma a saját eredményeimhez hasonlóan szignifikáns mértékben emelkedett a kontroll csoporthoz képest.
Ólom-acetát
A 0,01%-os koncentrációban alkalmazott ólom-acetát embriótoxikusnak bizonyult, az embrióra nézve káros hatásai a 19. napi feldolgozás adatai alapján főként a kontroll csoporthoz viszonyított szignifikáns testtömeg-csökkenésben nyilvánultak meg mindkét
131
kezelési mód esetében, valamint az injektálásos kezelés során jelentkező kiugróan magas embrióelhalásban, amely szintén szignifikáns növekedést jelent a kontroll csoportban tapasztalt elhalás értékhez képest.
Dikamin D
A gyakorlati permetlé töménységben (0,5%) alkalmazott Dikamin D herbicid embriótoxikusnak bizonyult, az embrióra nézve káros hatásai a 19. napi feldolgozás adatai alapján főként a kontroll csoporthoz viszonyított szignifikáns mértékű testtömeg-csökkenésben nyilvánultak meg mindkét kezelési mód esetében, valamint az injektálásos kezelések során szignifikáns mértékben nőtt a fejlődési rendellenességek előfordulásának gyakorisága és az elhalt embriók száma a kontroll csoporthoz viszonyítva.
Stomp 330 EC
A gyakorlati permetlé töménységben (1,25%) alkalmazott Stomp 300 EC herbicid embriótoxikusnak bizonyult, az embrióra nézve káros hatásai a 19. napi feldolgozás adatai alapján főként a kontroll csoporthoz viszonyított szignifikáns mértékű testtömeg-csökkenésben nyilvánultak meg mindkét kezelési módszer esetében, valamint az injektálásos kezelés során szignifikáns mértékben nőtt az elhalt embriók száma a kontroll csoportban tapasztalt elhalásokhoz képest.
A korábban SZABÓ (2008) által elvégzett vizsgálatok során a gyakorlati permetlé töménységben (1,25%) a tojásba injektált Stomp 330 EC a saját eredményeimhez hasonlóan a kontroll csoporthoz viszonyított szignifikáns testtömeg-csökkenést és az embrióelhalások számának szignifikáns mértékű növekedését okozta.