23 példa 23 példa
Tökéletesen kevert CSTR enzimes reaktorban Tökéletesen kevert CSTR enzimes reaktorban rakció folyik, amelyre érvényes a Michaelis- rakció folyik, amelyre érvényes a Michaelis-
Menten kinetika. Vezessük le az elfolyó lében Menten kinetika. Vezessük le az elfolyó lében mérhető szubsztrát koncentrációnak a higítási mérhető szubsztrát koncentrációnak a higítási
sebességtől ( tartózkodási időtől) való függését
sebességtől ( tartózkodási időtől) való függését
dt V dS V
r fS
fS
0
S r r S
K S
S
S S
max
S S
r S
K S
S
S 0
max
dt 0 dS S
K
S S) r
τ (S 1 S
K
S S) r
D(S
S 0 Smax
S
0 Smax
6. példa
BIM SB2001
Egy enzim meghatározásnál a kezdeti szubsztrát cc-ja 0.3 mol/dm
3. Az enzim K
mértéke = 2.6*10
-3mol/dm
3.
Ekkor sebességként 5.9*10
-5mol/dm
3min adódott.
Mekkora a termék koncentráció 10 perccel az inkubálás kezdete után, ha a kezdeti S
okoncentrációt 2*10
-5-nek választottuk?
Megoldás:
K
mS
o, így az első eset nulladrendű kinetikájú, azaz V=V
max. A másik eset viszont elsőrendű kinetikájú, azaz
k= V
max/K
m= 0.0227 min
-1és dS/dt= -kS ahonnan
lnS = lnS
o-kt = 0.0000159 mol/dm
3, ezért
P(10)=So-S(10)= 4*10
-6mol/dm
3.A szénsav-anhidráz enzim a következő reakciót katalizálja:
H
2O + CO
2HCO
3-+ H
+2,8.10
-9mol/l enzimbemérés esetén 7,1 pH értéken az alábbiakban megadott eredményeket mérték az előre illetve hátrafelé menő rekciókra:
DE
HIDRATÁLÁS HIDRATÁLÁSV0 mol/l.s CO2 mol/l V0 mol/l.s HCO3-
2,77.10-5 1,25.10-3 1,0526.10-5 2.10-3
5,0. 5.10-5 2,5. 10-3 2,222. 10-5 5. 10-3
8,33. 10-5 5. 10-3 3,4482. 10-5 10. 10-3
1,667. 10-4 20. 10-3 4,000. 10-5 15. 10-3
Számítsa ki a reakció egyensúlyi állandójának értékét.
31. példa
31. példa
BIM SB2001 Lineweaver-Burk ábrázolás.
Az előremenő reakció egyenese Y= 4000+40.X (R=1,000), Vmaxe= 1/4000=2,5,10-4 mol/l.s . Kme/Vmaxe =40, ahonnan Kme =10-2 mol/l.
A balra menő reakcióra a linearizált összefüggés
Y=13123 +163,2X (R=0,999), Vmaxh=7,62.10-5 mol/l.s és Kmh =1,24.10-2 mol/l.
4,068 K
V
K K V
me maxh
mh maxe
eq
Egyensúlyi állandó a Haldane egyenlet alapján
-20 1/V0
1/S 4000
13123
vissza
előre
1,0 g/dm
3inhibitor jelenlétében egy enzimmel a következő kezdeti reakciósebességeket mérték.
V
0g/dm
3.min S g/dm
30,909 20
0,658 10
0,493 6,67
0,40 5
0,333 4
0,289 3,33
0,227 2,5
Az enzimnek ismert a K
mértéke: 9,2 g/dm
3.
Vajon milyen inhibícióról van szó? Mekkora a K
i?
38. Példa megoldása
38. Példa megoldása
BIM SBL-B
2001A regressziós egyenes egyenlete Y= 0,600997 +9,5225.X.
V
max= 1,4292 g/dm
3.min
látszólagos K
m’=13,609 g/dm
3.
A látszólagos K
mmegnőtt (
9,2 g/dm3)azaz kompetitív inhibícióról van szó.
3
m , m i
i m
,
m
2.049 mol/dm
9.2 1 13.609
1 K 1
K K I
ahonnan K
1 I K
K
Felfedeztünk egy „új mikrobát”, amelynek különlegessége, hogy minden osztódáskor egy anyasejtből három azonos leánysejt
keletkezik(!). Ha a mikroba az alábbi táblázat szerint szaporodik, mekkora a generációs ideje?
Ferm.idő h Sz.a. g/l
0 0,1
0,5 0,15
1 0,23
1,5 0,34
2 0,51
3 t ln
t x
ln x
3 x 3
x x
g 0
t / t 0 n
0
g
ln x/x0 =0,815358 t
ln3/tg =0,8154 tg = 1,35 óra
tg=0,815358 ln (x/x0)
t
51. példa
51. példa
BIM SB2001 Szakaszos Aspergillus niger tenyésztés során a növekedést és a
szénforrás glükóz szubsztrát fogyását mérték:
Fermentáció ideje
h
Sejtkoncentráció
sz.a. g/l Glükóz g/l
0 1,25 100
9 2,45 97
16 5,1 90,4
23 10,5 76,9
30 22 48,1
34 33 20,6
36 37,5 9,38
40 41 0,685
Mekkora a maximális fajlagos növekedési sebesség?
Mekkora az eredő hozam?
Mekkora lenne a várható maximális sejtkoncentráció, ha 150 g/l kezdeti glükózkoncentrációt alkalmaztak volna?
lnx -idő diagram
0 0,5
1 1,5
2 2,5
3 3,5
4
0 10 20 30 40 50
Exp.fázis
ten g.metszet -0,0362 iránytangens 0,104009
Többféle megoldás van.
max=0,1 h-1
ln x ---- idő !!!
51. példa
51. példa
BIM SB2001
0.4g/g 100
0.625
1.25 41
S
Y X
61,25g/l 0,4.150
1.25 Y.S
X
X
,max
0
0
Vagy dx/dt (x/t ) – x görbéből μmax
Az eredő, az egész fermentációt jellemző hozam számítása:
Ha nagyobb kezdeti S koncentrációt alkalmaznánk, akkor
lenne a végső sejtkoncentráció.
Egy szubsztrát-inhibíciónak kitett kemosztát rendszerben a higítási sebesség 0,1 h-1
és S0= 0,2 kg/m3 . A kinetikai paraméterek a következők,
max = 0,2 KS = 2.10-3 kg/m3 Ki = 150. 10-3 kg/m3 Y=0,5.
Határozza meg az állandósult állapot(ok)ban a szubsztrát és a mikroba koncentráció(ka)t.
79. példa megoldása
i 2 S
max
K S S
K
S
2002
X
K S S
K
S Y
S 1 S
dt D dS
DX dt X
dX
i 2 S
max 0
X
K S S
K
S Y
S 1 S
D
DX X
i 2 S
max 0
μ D S DK 0
K S D
S max
2 i
i 2 S
max
K S S
K D S
D
Behelyettesítés, megoldás
2.0,6667
5,333.10 0,01
S 0,1
0 2.10
0,1S 0,667S
4 1,2
4 2
S1 = 0,002 kg/m3
S2 = 0,1479 kg/m3
Ebből X
1= 0,099 kg/m
3és X
2= 0,0026 kg/m
3.
2002 Egy baktérium aerob körülmények között növekedik glükóz C/en forráson, és egyedüli nitrogénforrásként ammónium-ionokat hasznosit. Kisérleti eredmények azt mutatták, hogy 6 C-mól glükóz felhasználásakor egy C-mol sejttömeg képzõdik.
Irja fel a sztöhiometriai egyenletet erre a tenyésztésre, ha a sejtösszetétel:
CH1,666 O0,27 N0,2.
98.példa megoldása
6 CH2O + bO2 + cNH4 CH1,666 O0,27 N0,2 + dH2O + eCO2 Irjuk fel az elemekre a mérlegegyenleteket:
C: 6 = 1 + e e=5
N: c= 0,2
H: 6*2 + 0,2*4 = 1,666 + 2*d d=5,567
O: 6 +2*b = 0,27 + 5,567 +2*5 b=4,918 aminek alapján a keresett egyenlet
6 CH2O + 4,918 O2 + 0,2 NH4 CH1,666 O0,27 N0,2 + 5,567 H2O + 5 CO2 CH2O + 0,82 O2 + 0,033 NH4 0,167CH1,666 O0,27 N0,2 + 0,928 H2O +0,83CO2
Saccharomyces cerevisiae-t 100 liter hasznos térfogatú bioreaktorban tenyésztünk kemosztátban.
Az elfolyó lé jellemzői állandósult állapotban: 8 g/liter szubsztrát és 20 g/liter sejtkoncentráció.
A bemenő tápoldat glükóz koncentrációja 50 g/l.
A fermentáció aerob, a N-forrás ammónia.
Mekkora a respirációs hányados és a metabolikus hőtermelés?
Adatok:
max= 0,5 h-1, Ks=2 kg/m3 , sejtösszetétel C8 H13O4 N.
2002
CH2O + aNH3 + bO2 ycCHpOnNq + (1-yc)CO2 + cH2O Keressük a sztöhiometriai egyenletet a következő formában
D S
S K h
S
max0 5 . 8 .
8 2 0 4
1A mikroba C-mól képlete: C H 13/8 O4/8 N 1/8 = CH 1,625 O0,5 N0,125
x Y S S
x s/ ebbõl Y
x s/ 0 476 , g g /
y
c Y
x s/
2 1
2 12 12 1 625 16 0 5 14 0125 / . * . * . 0 5134 . és
1 0 4 .
y
c 0 6109 ,
A H, O, N elemi mérlegekből a, b és c kiszámíthatóak, sorrendben 0,076 , 0,351 és 0,6176 és ennek alapján a sztöhiometriai egyenlet identifikált alakja
CH2O + 0,076 NH3 + 0,351 O2 0,6109 CH 1,625 O0,5 N0,125 + 0,3891 CO2 + 0,6176 H2O
Y y
b g g
o
c12 1
32 1 27
2. , /
Az oxigénhozam
Q Y g gh
o
0 315 , / dc
dt Q x . 6 3 , kgO m h
2/
36300
32 518 0 1
310198
g oxigén / m
3h * KJ mol / * , m KJ h / .
A metabolikus hő - oxigén ekvivalens értéke 518 KJ/mól oxigén, így a metabolikus hőtermelés: