• Nem Talált Eredményt

Molekuláris biológiai módszerek2015Wunderlich Lívius Sejttenyésztés

N/A
N/A
Protected

Academic year: 2022

Ossza meg "Molekuláris biológiai módszerek2015Wunderlich Lívius Sejttenyésztés"

Copied!
16
0
0

Teljes szövegt

(1)

Sejttenyésztés

Molekuláris biológiai módszerek 2015

Wunderlich Lívius

(2)
(3)

Baktériumok tenyésztése

E- coli törzsek a molekuláris biológiában Nem patogének

Különböző mértékben mutánsok

Enzimhiányosak: Metabolikus intermedierek Endonukleázok, metilázok, rekombinázok Szelektív táptalaj (aminosav- ill. nukleotid- anyagcsre intermedierek, antibiotikumok, mesterséges szubsztrátok, stb.)

37 ºC, O.N.

(4)
(5)

Folyadékkultúra Agar plate

Szélesztés Fagyasztás Tárolás

Transzformálás

Kezelés Lizálás

(6)
(7)

Saccharomyces cerevisiae

(8)

Folyadékkultúra Agar plate

Szélesztés Fagyasztás Tárolás

Transzformálás

Szinkronizálás Kezelés

Lizálás

(9)

Élesző tenyésztése

Élesztő törzsek a molekuláris biológiában Lehetnek különböző mértékben mutánsok Enzimhiányosak

Transzgenikusak

Szelektív táptalaj (aminosav- ill. nukleotid- anyagcsre, stb.)

max. 30 ºC, O.N. folyékony, 3-4 nap szilárd médiumon

(10)
(11)

Eukariota sejkultúra állatokból

(12)

Immortalizált (rákos) sejtvonalak Primer sejtvonalak

Tápfolyadék: Vitaminok, aminosavak, sók Letapadó, vagy folyadékkultúra

Borjú (fötális) szérum Glutamin

Cukor

Antibiotikum, antimikotikum

Piruvát, bikarbonát, indikátor (fenolvörös) Sejtvonalak őssejtekből

(13)

Médium csere Passzálás

Fagyasztás Olvasztás Éheztetés

Transzfektálás Kezelés

Lizálás

Ko-kultúra

Hibridóma (leuk. + B limf.) Szövetkultúra

(14)

Növényi sejtkultúra

Anorganikus sók Szerves anyagok Vitaminok

Hormonok

Totipotens sejtekből kallusz, vagy szuszpenzió Rügy vagy gyökér

Fagyasztás:

Magyas sókoncentráció, vagy dehidratálás

(15)

Transzfekció:

Vírusok

Agrobacterium Génpuska

Protoplaszt

Elektroporáció

(16)

Vírusok

λ-fág Bakulovírus

Adenovírus Lentivírus

Hivatkozások

KAPCSOLÓDÓ DOKUMENTUMOK

+ proteinase K, 100 μg/ml, 50°C, 3 h Tisztítás fenollal, vagy gradiensen Dializálás, vagy kicsapás. Sejtkultúrából, szövetből,

Primerek eltávolítása, 5’, 3’ végek Mung bean nukleáz. 5’ (3’) ssDNS exonukleáz főleg, ha a blunt end

X·2 ·n darab produkt X ·2 n-2 darab produkt DNS templát, dNTP mix, primerek, Mg 2+ , puffer, hőstabil DNS-polimeráz Taq: Thermus aquaticus...

30S alegységhez kapcsolódik, formil- metionin kapcsoló- dását

Energia transzfer: 1 féle gerjesztő, 4 féle emittáló, 5 nukleotid távolság, vagy linkerrel („big dye”). Dye-terminátor: nem kell specifikus primer Módosított,

20 perc mosás 0,01 N NaOH/3 M NaCl-ban, majd transzfer ugyanebben. Töltetlen

Wunderlich Lívius: Molekuláris Biológiai technikák Typotex 2014... Új molekuláris biológiai

SP6 promóter restrikciós enzim hasítóhelyek restrikciós enzim hasítóhelyek.. max., cos szekvencia, λ-fágba, eukariotába, E.. 3000) feltöltés. Telomér, centromér