Új molekuláris biológiai módszerek
Vektorok
2016
Könyvtár- készítés
cDNS, vagy genomi
Klónozás λ fágba
λ-fág
DNS
központi régió eltávolítása
idegen DNS beültetése λ DNS
λ „karok”
in vitro „csomagolás”
a kapszid fehérjékbe rekombináns,
fertőzőképes λ-fág
λ-fág, mint vektor
M13 alapú vektorok
Fágemid vektorok
kétféle replikáció,
transzdukció, vagy transzformáció
Kombinált klónozó/expressziós vektorok
téta replikációs origó
„rolling circle”
replikációs origó
ampicillin rezisztencia
gén
PCR-termék helye
T7 promóter
SP6 promóter restrikciós enzim hasítóhelyekrestrikciós enzim hasítóhelyek
Cosmid
Fosmid
Kozmidok: 40-50 kbp. max., cos szekvencia, λ-fágba, eukariotába, E. coliba
YAC: 100-1000 kbp.
(max. 3000) feltöltés.
Telomér, centromér régiók, repl. origó.
BAC BAC: F-faktor alapú,
120-300 kbp. max. feltöltés, Human Genom
Projekt szekvenálás repE (helicase) parA
parB
parC (egyenlő elosztás)
PAC: P1 fág alapú, könnyen rekombinálódik a genomba, 100-300 kbp.
centromer telomer replikációs
origók gén
normál kromoszóma
mesterséges kromoszóma
Humán mesterséges kromoszóma (HAC)
Lentivírus vektor felhasználhatósága
