RAPD analízis

A vizsgálatba az állami elismerésben részesített, a nemzeti leíró fajtajegyzékben szereplı összesen 16, Magyarországon legnagyobb területen termesztett fajtát vontunk be. A 16 fajtából hét árufajta, öt választékbıvítı fajta, valamint négy próbatermesztésre ajánlott fajta volt.

A kísérlet során az OPERON Co. által szintetizált B, C és O primerkit-et használtuk. Egy-egy kit 20 db, egyenként tíz nukleotidos primert tartalmaz. A kiválasztott 8 primer szekvenciáját, a reakcióelegy összetételét, valamint a felhasznált programot a 7. táblázat tartalmazza. A kísérletünkben a polimorf mintázatot ígérı reakciókat négyszer, ötször megismételtük, és csak a legélesebben megjelenı és reprodukálható fragmentumokat használtuk markerként. Az amplifikált mintákat 1%-os agaróz gélen választottuk el, majd az eredményeket ethidium-bromidos festési eljárással tettük láthatóvá. A kapott fragmentumokat 100 bp (Promega) méretmarkerrel vizuálisan értékeltük, és polaroid kamerával archiváltuk.

46

6. táblázat: A dolgozatban vizsgált fajták és hibridek származása, a mintagyőjtés helyszíne, a fajták pedigréje, jellemzı agronómiai tulajdonságaik és termékenyülési fenotípusuk FajtaSzármazás GénbankPedigré1,2,3Pomológiai tulajdonságok1Termé- kenyülés2,3 1AIA 0-10Ol.FMagonc S, Kny, -, Ngy, GyÉSC 2AIA 0-28Ol.FMagonc S, KKny, -, Kz, GyÉSC 3AIA 0-68Ol FMagonc Ncs, Kny, -, Kz, GySSC 4Albena Mo. T. Szilisztrenszka kajszija × KrasznoscsokijSN, KKny, MÉ, Kz ? 5Ananasznij cjurpinszkijUkr.Sz.IsmeretlenViN, KKny, MÉ, Kz, GyÉSC 6Andornaktályai magyar kajszi Mo. T. Magyar kajszi tájszelekciójaSN, KKny, MÉ, - SC 7Arvam aramatK-Á. L. Ismeretlen?? 8BachingerK-E. B. Magonc ViN, Kny, -, Kz, GySSC 9BebecoGro. Sz.Véletlen magonc ViN, Kny, MKő, Ngy, GyÍ SC 10BergeronFro. T. Véletlen magonc (1920) Ncs, Kny, MÉ, Kz, GyÍ SC 11Bhart USAB. Lasgerdi Mashhadi × NJA2SN, KKny, MÉ, Ngy, - SI 12Borjana Mol.T. Magyar kajszi × Jerevani ?? 13Borsi-féle kései rózsa Mo. T. Ismeretlen, KecskemétNcs, Kny, -, Kcs, - SC 14BronzovijUkr.Sz.Khurmai × Krasznij partizanNcs, -, MÉ, Kz, -? 15Budapest Mo. Sz.Nancy × (Acme, Magyar kajszi, Kései rózsa)ViN, Kny, -, Ngy, GySSC 16BukurijaMol.Sz.Salah szabadbeporzású magoncaViN, P, MÉ, Kcs, - SI 17Csacsanszko zlatoSzb. T. Magyar kajszi tájszelekciója-, -, -, Ngy, - SC 18Callatis Rom. Sz.(Tarzii de Bukuresti × Ananas) × (Luizet × Umberto) Ncs, KKny, -, Ngy, - SC 19Ceglédi aranyMo. Sz.Rózsabarack C. 1668 × Ceglédi óriásS, Kny, -, Ngy, GyÍ SC 20Ceglédi bíborkajszi Mo. Sz.Véletlen magonc SN, P, MÉ, Ngy, GyÉSC 21Ceglédi kedvesMo. T. Ceglédi óriás szabadbeporzású magoncaNcs, Kny, -, Kz, GyÍ SC 22Ceglédi óriásMoTTájszelekció, Izsák (1953) SN, KKny, MÉ, Ngy, GyÍ SI 23Ceglédi Piroska Mo. Sz.Ceglédi óriás × Magyar kajszi C.1789Ncs, KKny, MÉ, Kz, -SI

47

FajtaSzármazás GénbankPedigré1,2,3Pomológiai tulajdonságok1Termé- kenyülés2,3 Chersonszkij 1469Ukr.Sz.Magyar kajszi klónSN, KKny, MÉ, Kz, -SC CIV 1. O. F. Magonc ?? Comandor Rom. Sz.Marculesti 17/52 × Marculesti 43/1SN, KKny, MÉ, NgySC Crvena Ungarska Mac. T. Magyar kajszi szelektált klónjaSN, Kny, MÉ, Kz, GyÍ SC Darunek malahojeva Ukr.TIsmeretlen?SC Dionis 1482Ukr.Sz.Salah × Kok-psár ViN, P, -, Kcs, - ? Dolgocsukna K-ESz.Magyar kajszi szelektált klónja ?SC Dr. Mascle Fro. B. Ismeretlen?? Effekt Ukr.Sz.Krupnolodnij szabadbeporzású magoncaS, KKny, MÉ, Ngy, - SC SalahÖrm. Sz.Örmény tájfajta ViN, Kny, MÉ, Ngy, GyÉSI FesztivalUKRSz.Ismeretlen?? GoldrichUSASz.Sunglo × PerfectionNcs, Kny, -, Ngy, - SI Gönci magyar kajszi MoT. Magyar kajszi szelektált klónjaSN, P, MÉ, Kz, GyÉSC GulkinP. B. Magonc Ncs, Kny, MÉ, Kcs, GyÉSI? Harcot KanT. (Geneva × Narmata) × Morden 604 × NJA1 (Perfection × Phelps) (1977) SN, Kny, MÉ, Kz, GyÉSI HarmatMo. Sz.Salah szabadbeporzású magoncaNcs, P, MKő, Kz, -SI HunzaP. BMagonc Ncs, Kny, MÉ, Kcs, GyÉSI? JunszkijMol.Sz.Salah szabadbeporzású magoncaS, P, MÉ, Kcs, - SC KalasekCso. L. Magyar kajszi szelektált klónjaSN, Kny, MÉ, Kz, GyÍ SC Karim-AbadP. B. Magonc Ncs, Kny, MÉ, Kcs, GyÉSI? KarolaSzlo. L. Koloboucka × Velkopavlovicka SN, Kny, -, Kz, -SC Kecs-psár Üzb. Sz.Helyi fajta S, Kny, MÉ, Kz, -SI Kecskemét (késıi)Mo. T. Véletlen magonc ViN, Kny, -, Kz, -SC Kecskemét (korai)Mo. T. Véletlen magonc ViN, Kny, -, Kz, GySSC KjurmaiK-Á. L. IsmeretlenS-Ncs, P, MÉ, Kz, GyÉSI Kijevszkij aromatijUkr.Sz.???

48

FajtaSzármazás GénbankPedigré1,2,3Pomológiai tulajdonságok1Termé- kenyülés2,3 50Kletnice Cso. L. Helyi szelektált klónViN, KKny, MÉ, Kz, GyÉSC 51KlosterneuburgerAuB. Ismeretlen magonc ViN, Kny, MKő, Kz, GyÉSC 52. Konkurencia Ukr.L. Effekt × Priuszadebnij rannijNcs, -, MÉ, Kz, -? 53. Konzervnij podznijUkr Sz.Véletlen magonc SN, KKny, MÉ, Ngy, - SC 54Korai Piros Mo. Sz.Ismeretlen eredető tájfajta Ncs, P, MÉ, Kcs, - SC 55Korai Zamatos Mo. Sz.Jubilar szabadbeporzáső magoncaNcs, KKny, MÉ, Kz, GyÉSI 56KrasznoscsokijUkr.Sz.Magyar kajszi szelektált klónjaSN, KKny, MÉ, Ngy, - SC 57 Krimszkij Amur Ukr.T. Mulla sadik × UdarnikNcs, Kny, MÉ, Ngy, - SC 58Kâszna ungarska Bul T. Magyar kajszi szelektált klónjaSN, -, MÉ, Kcs, - SC 59Kuresia Eu, ÉAB. ?ViN, Kny, -, Kz, GyÉ-GySSC 60Ligeti óriásMo. T. Tájszelekció, Dózsamajor (1959) Ncs, KKny, MÉ, NNgy, - SI 61Litoral Rom. Sz.(Luizat × Umberto) × (Ananas × Ananas) ?? 62LuizetFro. FIsmeretlen magonc ViN, Kny, MÉ, Kz, GyÉSC 63M2000 mPakB??? 64Magyar kajszi C.235Mo. TMagyar kajszi szelektált klónjaSN, Kny, MÉ, Kz, GyÍ SC 65Mandulakajszi Mo. TIsmeretlen (1954) Ncs, KKny, MÉ, Ngy, GyÍ SC 66Mari de CenadRom. Sz.Ismeretlen eredető helyi fajta Ncs, KKny, -, Ngy, - SC 67MarilleK-E. BIsmeretlen magonc ViN, -, -, Kz-NgySC 68Moniquí SpoSz ?S, P, MKő, NNgy, GyÉSI 69Morden 604KanSz IsmeretlenS, P, -, Kcs, - SC? 70MT 6/17 (T-6, transzgénikus)K-Eur BKései kecskeméti szabadelvirágzású utódja?SC 71MT 8/9 (T-8, transzgénikus)K-Eur BKései kecskeméti szabadelvirágzású utódja?SC 72Murfatlar RomSz.?ViN, -, -, Kcs, - ? 73Nagygyümölcső m. kajszi MoTMagyar kajszi szelektált klónjaSN, Kny, MÉ, Kz, GyÍ SC

49

FajtaSzármazás GénbankPedigré1,2,3Pomológiai tulajdonságok1Termé- kenyülés2,3 NarjadnijUkr.Sz Oranzsevo Krasznij × ShirazkijViN, -, MKő, Kz, -? NyikitszkijUkr.Sz.Krasznocsokij szelektált klónja?SC P.x dasycarpaOl.BP. cerasifera × P. armeniaca?? Paksi magyar kajszi Mo. T. Magyar kajszi szelektált klónjaSN, KKny, MÉ, Kz, -SC PaszinokUkr Sz.Vinoszlivij × SalahViN, KKny, MÉ, Kz, -SC Pieber (13,15,17) K-E. BIsmeretlen?SC Pisana Ol.Sz.Toscaniai korai önbeporzásNcs, KKny, -, Ngy, - SC Plumcot USASz.P. armeniaca x P.saliciana- ? Poldij junszkijMol Sz.- - - PolonaiseFro. Sz.Véletlen magonc ViN, Kny, MÉ, Kz, GyÉSC Priana FroF. Canino × Hamidi S, P, -, Kcs, - SI Priuszadebnij rannijUkr.Sz.Szamarkandszkij rannij × KrasznoscsokijViN, P, MÉ, KcsSI? P. briganticaFro. B. Ismeretlen?? RakovszkyMo. T. Véletlen magonc, Kocsóc SN, -, MÉ, Kz, -SC Rakvice CsoL. Ismeretlen?? Rana Dokucana K-E. L. Ismeretlen?? RosensteinerK-E. B. Magonc ViN, Kny, -, Kz, GySSC? Rouge de SernhacFro. B. Véletlen magonc ViN, Kny, MKő, Kz, GyÉSC Rózsakajszi C.1406Mo. T. Tájszelekció, Nagykırös Ncs, KKny, -, Kz, GyÉSC Sabinovska Szlo. L. Magyar kajszi szelektált klónja?SC Szamarkandszkij rannijK-Á. Sz.Krasznoscsokij × Majszkaja szkoroszpelka Ncs, KKny, MÉ, Kcs, GyÉSI San CaestreOl.F. IsmeretlenSN, Kny, -, Ngy, - SC Selena Rom. T. (Luizet × Umberto) × (Ananas × Ananas) SN, KKny, -, Ngy, GyÍ SC Silvercot USAB. Új nemesítéső fajta?? Sirena Rom. Sz.(Ananas × Ananas) × (Luizet × Umberto) -, -, -, Ngy, - SC Spätblühende KochK-E. B. ?SN, -, -, Ngy, GyÉSC 0Sulmona Rom. Sz.(Luizet × Umberto) × (Ananas × Ananas) Ncs, KKny, -, Ngy, - SC

50

FajtaSzármazás GénbankPedigré1,2,3Pomológiai tulajdonságok1Termé- kenyülés2,3 101Szegedi mamut Mo. Sz.Tájszelekció?Ncs, KKny, MÉ, Ngy, GyÍ SI 102Szilisztrenka kompotna K-E. Sz.Magyar kajszi szelektált klónjaSN, Kny, MÉ, Kz, GyÍ SC 103Szkopszka krupna K-E. Sz.Magyar kajszi szelektált klónjaSN, Kny, MÉ, Kz, GyÍ SC 104TiltonUSAB. IsmeretlenS, Kny, MÉ, Ngy, - SC? 105TomisRom. T. Ismeretlen-, -, -, ENgy, - ? 106Ungarische BesteK-E. B. Magyar kajszi szelektált klónjaVöN, Kny, MÉ-MKő, Kz, GyÉ-GySSC 107UzsgorodUkr.T. Ismeretlen?? 108VAV B1K-E. B. IsmeretlenViN, Kny, -, Kz-Ngy, GyÉ- GySSC 109Veecot USASz.Reliable szabadmegporzású magoncaVöN, Kny, MKő, Kcs, GyÉSI 110VelkijUkr.L. Ismeretlen?? 111Velkopavlovicka Cso. L. Magyar kajszi szelektált klónjaSN, KKny, MÉ, Kz, GyÍ SC 112Venus Rom. Sz.(Umberto × Ananas) × (Luizet × Umberto) Ncs, KKny, -, Ngy, - SC 113Vesna K-E. FMagyar kajszi szabadmegporzású magoncaNcs, Kny, -, Ngy, - SI 114Vinschger MarilleOl.B. Helyi fajta ViN, KKny, MÉ, Kz, GyÉSC 115Vnuk partizana Ukr.Sz.Krasznij partizan szabadmegporzású magoncaViN, KKny, MÉ, Ngy, - ? 116VognicUkr.L. Ismeretlen?? 117Voszki Ukr.Sz.Sateni szabadmegporzású magoncaS, KKny, -, Ngy, - SI 118Zaposzdolje Ukr.Sz.IsmeretlenNcs, -, MÉ, Kz, -SC 119ZardÜzb. Sz.Zardalju szabad megporzású magonca, VIR intézet S, P, -, Kcs, - SI 1, Maghuly és mts., 2005. 2, Halász, 2007 3, Halász és mts., 2007.

6. táblázat rövidítéseinek magyarázata:

Származás: Au.: Ausztria; Bul.: Bulgária; Cso.: Csehország; Fro.: Franciaország;

Gro.: Görögország; Kan.: Kanada; K-Á.: Közép-Ázsia; K-E.: Kelet-Európa;

Mac.: Macedónia; Mo.: Magyarország; Mol.: Moldávia;

Ol.: Olaszország; P.: Pakisztán; Rom.: Románia; Szb.: Szerbia;

USA: Amerikai Egyesült Államok; Ukr.: Ukrajna; Üzb.: Üzbegisztán Győjtési hely B.: Bécs; F.: Ferrara; L.: Lednice; Sz.: Szigetcsép; T.: Tordas Gyümölcsszín: ViN: világos narancs, SN: sötét narancs, S: sárga, Ncs: narancs, VöN: vörös narancs

Gyümölcs konzisztencia: Kny: kemény, P: puha, KKny: közepesen kemény A magház íze: MÉ: édes, MKő: keserő

Gyümölcsméret: ENgy: extrém nagy, NNgy: nagyon nagy, Ngy: nagy, Kz: közepes, Kcs: kicsi

Gyümölcsíz: GyÉ: édes, GyS: savas, GyÍ: ízletes

7. táblázat: A RAPD reakció paraméterei és a felhasznált primerszekvenciák

A PCR reakció lépései A PCR reakció elegy összetétele:

1. 94°C 2 perc Komponens Koncentráció.

2. 92°C 1 perc Primer 25 pmol

3. 33°C 1 perc DNS templát 30 ng/µl

4. 72°C 1.30 perc

DNA Red Taq polimeráz

1 unit

5. 72°C 2 perc dNTP mix 10 mmol

6. 4°C 10x puffer 1,5 m MgCl2

40 cikluson keresztül Steril H₂O -

A polimorf mintázatot eredményezı primerek bázissorrendje

Primer név Szekvencia

OPB-08 5’-GTC-CAC-ACG-G-3’

OPB-09 5’-TGG-GGG-ACT-C-3’

OPB-16 5’-TTT-GCC-CGG-A-3’

OPC-06 5’-GAA-CGG-ACT-C-3’

OPC-11 5’-AAA-GCT-GCG-G-3’

OPC-14 5’-TGC-GTG-CTT-C-3’

OPC-15 5’-GAC-GGA-TCA-G-3’

OPC-20 5’-ACT-TCG-CCA-C-3’