Közeli infravörös
spektroszkópia és mikroszkópia
Gergely Szilveszter
Budapesti Műszaki és Gazdaságtudományi Egyetem Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszertudományi Tanszék
Optikai spektroszkópia 2014. október 29.
black box
▼ grey box
(N)IR elfogad-
tatása
2
Newton kísérletei I. – a fehéren túl
(1704)
Már korábban más is meg-
csinálta, de ő le is írta...
3
Newton kísérletei II. – a fehéren túl
(1704)
4
Herschel kísérletei – a vörös alatt
(no meg az Uránusz és a marslakók...)
1800. február 11.
Uránusz felfedezése:
1781. márc.
13-án háza udvaráról.
5
IR – hő – energia
(egy régi trükk mai kivitelben)
An AC-130U gunship fires flares to emit masses of infrared and confuse heat seeking missiles.
http://www.wired.com/dangerroom/2012/10/infrared-obscurant/
IR sugárzással
a hőkövető rakéták ellen…
A kis
„csillagok”
melegebbek a hajtóműnél.
6
Rezgések és hullámok (USA vs. Magyarország)
(egy budapesti villamos, “sárga szöcske”, 2011)
(Tacoma Narrows Bridge, “Gallopin’ Gertie”, 1940. november 7.)
BME:
Schönherz Qpa vs. 4-6 villamosok.
7
A spektrum a molekuláris állapotváltozások összessége:
kémiai és fizikai „ujjlenyomat”.
deformációs rezgés
változás a kötésszögben
szimm. vegyértékrezgés
változás a kötéshosszban
aszimm. vegyértékrezgés
változás a kötéshosszban
A molekulák rezgései
8
Egy gyors példa a (M)IR-re
NIR : IR___1 : 1009
És egy másik gyors példa NIR-re
0 1 2 3
1100 1300 1500 1700 1900 2100 2300 2500
Wavelength (nm)
O D
0 1 2 3
1100 1300 1500 1700 1900 2100 2300 2500
Wavelength (nm)
O D
víz (H 2 O)
etanol (CH 3 –CH 2 –OH)
0 1 2 3
1100 1300 1500 1700 1900 2100 2300 2500
Wavelength (nm)
O D
bor
10 mm 4 mm 1 mm 10 mm
4 mm 1 mm
10 mm 4 mm 1 mm
Gergely S., Farkas K., Forgács A., Salgó A.: Quantitative and qualitative differentiations of alcoholic beverages by near infrared spectroscopy.
In Near Infrared Spectroscopy: Proceedings of the 11th International Conference, Ed by Davies A.M.C., Garrido-Varo A., NIR Publications, Chichester, pp. 569–572 (2004).
Murray I.: Scattered information: philosophy and practice of near infrared spectroscopy. 10 In Near Infrared Spectroscopy: Proceedings of the 11th International Conference, Ed by Davies A.M.C., Garrido-Varo A., NIR Publications, Chichester, pp. 1–12 (2004).
Jellemző NIR elnyelési sávok
Minden, ami nekünk kell:
víz, fehérjék, lipidek, szén-
hidrátok.
0 11 5 10 15 20 25 30 35
0 10 20 30 40 50 60 70 <
Invert sugar (g/l)
F re q u e n c y
dry wines
medium dry wines
medium sweet wines
sweet wines
“aszú” wines
Puttony- szám meghatáro-
zása?
12 0
2 4 6 8 10 12
10 11 12 13 14 <
Total alcohol (% V/V)
F re q u e n c y
0 5 10 15 20
15 30 45 60 75 90 <
Total extract (g/l)
F re q u e n c y
7 0.9943 0.1176 0.006 factor
R SEC MSECV
5 0.9990 0.8146 0.226 factor
R SEC MSECV
Bor – PQS után PLS I.
13 0
5 10 15 20 25
15 20 25 30 <
Sugar-free extract (g/l)
F re q u e n c y
0 5 10 15 20 25 30 35
0 10 20 30 40 50 60 70 <
Invert sugar (g/l)
F re q u e n c y
7 0.9981 1.1012 0.796 factor
R SEC MSECV
7 0.8328 1.1369 0.847 factor
R SEC MSECV
Bor – PQS után PLS II.
0 14 1 2 3 4
0 10 20 30 40 50 60 70 80
Reducing sugar (g/l)
F re q u e n c y
brut and extra dry champagne
dry champagne
medium dry champagne
sweet champagne
Tankpezsgő:
technológia nyomon követése.
15 0
1 2 3 4 5 6
11 12 13
Total alcohol (% V/V)
F re q u e n c y
0 1 2 3 4
0 10 20 30 40 50 60 70 80
Reducing sugar (g/l)
F re q u e n c y
7 0.9726 0.0816 0.003 factor
R SEC MSECV
6 0.9989 1.0579 0.348 factor
R SEC MSECV
(refilling 3×)
(refilling 3×)
Pezsgő – PQS után PLS
16 liqueurs
vermouths alcohol content
extract content low
low high
high
Töményebb szeszek – PQS
17
Borban az igazság...
... ez nem a reklám helye
OBI (hatóság),
Törley (ipar),
...
Törley-díj
(diplomaátadás • 2003. júl. 18.) konferencia poszter
(NIR-2003 • 2003. ápr. 6-11.)
18
Borban az igazság...
... ez nem a reklám helye
...
Villány (gazda bolt) 2006.06.30.
19
Borban az igazság...
... de hogy jön ez ide?
gyógyszer
= bor
?
20
Borban az igazság...
... fiziológiai és fermentációs folyamatok
FOSS: Wine segment brochure.
P/N 1026597, Issue 1 GB, Jan. 2012.
A hordóról már inkább elhisszük...
Szőlőszem, mint bioreaktor
? (PhD)
21
Borban az igazság...
... léptéknövelés
FOSS: Wine segment brochure.
P/N 1026597, Issue 1 GB, Jan. 2012.
... a rozsda- mentes tartályokról
nem is beszélve.
bor
= gyógyszer
22
Borban az igazság...
... technológia, mintavétel, analitika
FOSS: Wine segment brochure.
P/N 1026597, Issue 1 GB, Jan. 2012.
||: :||
bor
= gyógyszer
23
A PAT eszközei:
• hagyományos in-line érzékelők (pH, pO 2 , pCO 2 , T szondák)
• a folyamat monitorozó eszközeinek kibővítése egyéb real-time technikákkal
(in-/on-line NIR/Raman/IR, in-/on-line HPLC, stb.)
• Korszerű és gyors at-line mérések
• Korszerű adatgyűjtő rendszer (SCADA)
• Kemometriai (MVA) szoftverek (PCA, PLS stb.)
PAT (Process Analytical Technology)
= a folyamat kézben tartása
24
NIT
~ 800-1100 nm kisebb hullámhossz
nagyobb energia
NIR *
~ 1100-2500 nm
nagyobb hullámhossz kisebb energia
( * ≠ ... UV, VIS, NIR, (M)IR, FIR, ...)
Hogyan mérjük? – NIT és NIR
!!! RAJZ !!!
Abs.
vs.
Scat.
25
Hogyan mérjük? – diszperzió
Belső standardok,
ha elromolna.
26
Hogyan mérjük? – FT
ATR: pl.
gyémánt (vizes old.- ok; sav/lúg;
5,7 t/mm2).
27
A PAT eszközei:
• hagyományos in-line érzékelők (pH, pO 2 , pCO 2 , T szondák)
• a folyamat monitorozó eszközeinek kibővítése egyéb real-time technikákkal
(in-/on-line NIR/Raman/IR, in-/on-line HPLC, stb.)
• Korszerű és gyors at-line mérések
• Korszerű adatgyűjtő rendszer (SCADA)
• Kemometriai (MVA) szoftverek (PCA, PLS stb.)
PAT (Process Analytical Technology)
= a folyamat kézben tartása
28
...-line, ...-line, de melyik? I.
„[...] These measurements can be:
at-line:
Measurement where the sample is removed, isolated from, and analyzed in close proximity to the process stream.
on-line:
Measurement where the sample is diverted from the manufacturing process, and may be returned to the process stream.
in-line:
Measurement where the sample is not removed from the process stream
and can be invasive or noninvasive [...]”
29
...-line, ...-line, de melyik? II.
William Whitford W., Julien C.:
Analytical Technology and PAT.
BioProcess InternationalJanuary 2007, 32–41
30
Az in-/on-line eszköze – a száloptika I.
Igen, törhetnek.
:(
31
Az in-/on-line eszköze – a száloptika II.
32
Az in-/on-line eszköze – a száloptika III.
33
Technológiába illeszthető (egyéb) eszközök I.
Valósidejű:
keverő dobon (fix t helyett adott
minőség).
Több- csatornás elrendezés.
34
Technológiába illeszthető (egyéb)
eszközök II.
35
Mobil, hordozható (handheld) eszközök
Pl. Los Angeles-i rendörség, futószőnyeg szeméttelep.
NIR FT-IR Raman
36
Ha egyedül nem megy
Lee K.A.:
Review of applications of near infrared spectroscopy to food analysis.
The NIR Spectrum2(2), 11–16 (2004)
A „NIR kesztyű” összetevői:
NIR – oldható cukrok • hangimpulzus – keménység, Vis – érettség (klorofil) • potenciométer – méret
Áram drót nélkül...
37 http://www.gene.com/gene/about/views/followon-biologics.html
Klasszikus API vs. biomolekulák
38
E. coli emlőssejtek
Kikkel termeltetünk?
Tabletta 1-2 paraméter,
de E. coli, CHO ?
39
Na akkor, modellezzünk...
40
A végső cél
41
Off-line-tól a real-time-ig
42
Fermentáció ( E. coli ) off-line nyomon követése: PQS módszer
Ha megvanmég a puttonyszám
...
43
Fermentáció ( E. coli ) off-line nyomon
követése: PQS módszer
44
Fermentáció ( E. coli ) off-line nyomon
követése: PQS módszer
45
Fermentáció ( E. coli ) off-line nyomon
követése: PQS módszer
46
Fermentáció ( E. coli ) off-line nyomon
követése: PQS módszer
47
►
►
►
►
►
►
Fermentáció ( E. coli ) off-line nyomon
követése: PQS módszer
48
►
►
►
►
Fermentáció ( E. coli ) off-line nyomon
követése: PQS módszer
49
►►
Fermentáció ( E. coli ) off-line nyomon
követése: PQS módszer
50
Fermentáció ( E. coli ) off-line nyomon
követése: PQS módszer
51
Fermentáció ( E. coli ) off-line nyomon
követése: PQS módszer
52
A változékonyság leírása: PCA
Méret (PC1)
Kulcs feje (PC2)
Szín
(PC3)
nagy (kapu) átlagos (ajtó) kicsi (asztal)
kerek ovális téglalap sokszögű
oxidált fém kék ciklámen sárga
53
PC2 vs. PC1
Méret (PC1) Kulcs feje
(PC2)
nagy (kapu) átlagos
(ajtó) kicsi
(asztal)
kerek ► ovális ► sokszögű ►
téglalap ►
54
PC2 vs. PC3
Szín (PC3) Kulcs feje
(PC2)
kerek ► ovális ► sokszögű ►
oxidált fém kék ciklámen sárga
téglalap ►
55
Gabona minták termesztési helyei
Franciaország (Clermont-Ferrand) betakarítás éve: 2007
Magyarország (Martonvásár)
betakarítás éve: 2005, 2006, 2007
Lengyelország (Dankow/Choryn) betakarítás éve: 2007
Egyesült Királyság( Bury St. Edmunds) betakarítás éve: 2007
G×E hatás vs. PCA I.
Mert:bio.56
fa jt a G × E k é s z ü lé k
é v já ra t
G×E hatás vs. PCA II.
57
Forma 1 Forma 2 Forma 3
Forma 4 Forma 5
100 μm
Polimorf transzformációs vizsgálat:
fénymikroszkópos felvételek
Forma 2
Forma 1
Forma 5
58
Polimorf transzformációs vizsgálat:
in-line Raman-száloptika (PCA)
59
Fermentáció ( E. coli ) in-line nyomon követése: kevertetés, fizikai helyzet
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8
800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 2200
Wavelength (nm )
A = log (1/T) [l = 2 mm]
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8
800 1000 1200 1400 1600 1800 2000 2200
Wavelength (nm )
A = log (1/T) [l = 2 mm]
90° 270°
400 | 600 | 800 | 1000 | 1200 | 1400 | 1600 | 2000 rpm
60 0
2 4 6 8 10
0 3 6 9 12 15 18 21
Time (hour) Gly (g L-1 )
0 2 4 6 8 10 12
0 3 6 9 12 15 18 21
Time (hour) Ace (mmol L-1 )
Fermentáció ( E. coli ) in-line nyomon követése: diszp. NIR-rel PCA, PLS
Habzás- gátló, glükóz adagolása...
61
API meghatározása – simítás hatása a derivált képzésére
61 Az első és második
deriváltak képzése a
kezeletlen spektrumokból más-más beállításokkal történik:
Diszperziós NIR esetén:
2, 4, 8, 12, 16, 20 nm-es (1, 3, 5, 7, 9, 11 pontos) kapu
[„gap-segment” derivált]
FT-NIR esetén:
5, 9, 13, 19, 25, 37, 49, 149 pontos kapu
[Savitzky-Golay derivált]
-0,0075 -0,0025 0,0025 0,0075 0,0125 0,0175 0,0225
1100 1300 1500 1700 1900 2100 2300 2500
hullám hossz (nm )
1. derivált log (1/R) [2|0 nm]
-0,0400 -0,0200 0,0000 0,0200 0,0400 0,0600 0,0800 0,1000 0,1200
1100 1300 1500 1700 1900 2100 2300 2500
hullám hossz (nm )
1. derivált log (1/R) [20|0 nm]
NIR
2 nm
20 nm 1. derivált
1. derivált
62
-0,0045 -0,0035 -0,0025 -0,0015 -0,0005 0,0005 0,0015 0,0025 0,0035 0,0045
1100 1300 1500 1700 1900 2100 2300 2500
hullám hossz (nm)
2. derivált log (1/R) [2|0 nm]
-1,20E-04 -1,00E-04 -8,00E-05 -6,00E-05 -4,00E-05 -2,00E-05 0,00E+00 2,00E-05 4,00E-05 6,00E-05
1100 1300 1500 1700 1900 2100 2300 2500
hullámhossz (nm )
2. derivált log (1/R) [5 pont]
-0,0900 -0,0700 -0,0500 -0,0300 -0,0100 0,0100 0,0300 0,0500 0,0700 0,0900
1100 1300 1500 1700 1900 2100 2300 2500
hullám hossz (nm )
2. derivált log (1/R) [20|0 nm]
-3,00E-05 -2,00E-05 -1,00E-05 0,00E+00 1,00E-05 2,00E-05 3,00E-05
1100 1300 1500 1700 1900 2100 2300 2500
hullámhossz (nm )
2. derivált log (1/R) [49 pont]
NIR FT-NIR
62
2 nm
20 nm
5 pont
49 pont 2. derivált
2. derivált
2. derivált
2. derivált
API meghatározása – diszperziós vs.
FT (pl. detektorok)
63
0,96 0,96 0,96 0,96 0,96 0,97
0,98 0,98 0,98 0,97 0,97 0,97 0,98 0,99 0,98 0,98 0,98 0,97 0,97 0,95
0,96
0,96
0,96
0,97
0,95
0,96
11
8 8 8 8 8 9
7 7 7 7 7 7
0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1
S D1_2nm D1_4nm D1_8nm D1_12nm D1_16nm D1_20nm D2_2nm D2_4nm D2_8nm D2_12nm D2_16nm D2_20nm 0,88 0,89 0,90 0,91 0,93 0,95 0,96
0,97
0,97
0,98
1,00
1,00
0,89
0,90
0,97
0,97
0,98
0,98
0,97
0,98
0,98
0,98
0,97 0,94
0,91
0,89
0,87
0,95 0,95 0,95 0,65 0,68 0,77 0,85
11
7 7 7 7 8
9 9
11
3
7 8
7 7 7 8
3 0
5 10 15 20 25
Faktor
0,75 0,78 0,79 0,81 0,82 0,72
0,61 0,56 0,60 0,62 0,63 0,64 0,58 0,41 0,54 0,58 0,60 0,62 0,64 0,84
0,80
0,78
0,75
0,71
0,84
0,76
11
8 8 8 8 8 9
7 7 7 7 7 7
0 0,5 1 1,5 2 2,5
S D1_2nm D1_4nm D1_8nm D1_12nm D1_16nm D1_20nm D2_2nm D2_4nm D2_8nm D2_12nm D2_16nm D2_20nm
NIR FT-NIR
1,37 1,31 1,24 1,15 1,01 0,87
0,63 0,50 0,54 0,59 0,65 0,61 0,57 0,62 0,65 1,21 1,27 0,24 0,24 0,48 0,66 0,69 0,73
1,48
1,88
2,21
2,30
0,87
0,87
0,89 1,42 1,28 1,13 0,94
11
7 7 7 7
8 9 9 11
3 7
8
7 7 7 8
3
S D1_5pt D1_9pt D1_13pt D1_19pt D1_25pt D1_37pt D1_49pt D1_149pt D2_5pt D2_9pt D2_13pt D2_19pt D2_25pt D2_37pt D2_49pt D2_149pt
0 5 10 15 20 25
Faktor
alap spektrum
első derivált spektrum második derivált spektrum R
2R M S E ( ‰ )
API meghatározása –
teljesítménymutatók (figure of merit)
Kritikus - kontrollált
példa:
Down-kor 35 év alatt.
Élelmiszer botrányok:
mert jobb az analitika + a híráramlás.
64
A feltárás lépései – (IQ)Q = IQ 2
Identification – azonosítás
Ki vagy te?
éles spektrális különbségek keresése
korreláció, euklédeszi távolság stb.
Qualification – minősítés
Hová tartozol?
szubpopulációk definiálása finomabb eltérések alapján
főkomponens analízis (PCA), Mahalanobis-távolság stb.
Quantification – mennyiségi meghatározás
Mennyi az annyi?
referencia paraméterekkel kalibrációk
részleges legkisebb négyzetek (PLS) módszere stb.
65
Spektrumkönyvtár – anyagazonosítás (NIR)
18 termék, 27 tétel
censored
censored censored
SNV MSC
„nyers”
66
Spektrumkönyvtár – anyagazonosítás (analitikai IR)
65 anyag, 390 tétel
10 / 10 vs.
100 / 10 + géprom-
bolás.
67
Spektrumkönyvtár – anyagazonosítás (analitikai IR)
65 termék, 390 tétel
Hatóanyag- beszállító:
Kína, India (tetrakain).
68
„near-infrared AND imaging AND pharma” kulcsszóra
történő keresés (2011.10.20.)
Web of Science
ScienceDirect
Progresszív fejlődés
Spektrális hiperkocka
1 3
7 4 6 7
5
11 14 18
31 30 48
43
1 1 1 4 5 4
10 10 5
18
0 10 20 30 40 50 60
1994 1996 1997 1998 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011
év
közlemény (db)
Web of Science
ScienceDirect
Spektrális hiperkocka vs. tudomány
De mi volt 1994 előtt?
69
Az eszközök fejlődése – (hideg)
háborúkon keresztül (II. világháború)
WunderWaffe 1 - vampire vision: could be used by the snippers at night because of its infrared vision.
http://obviousmag.org/en/archives/2010/07/extraordinary_weapons_of_the_nazi_germany_-_techno.html#ixzz2ahKgFiQw Éjjellátók
kezdete:
„vámpír egység”
(németek).
70
Az eszközök fejlődése – (hideg)
háborúkon keresztül (hideg háború)
http://www.togtech.com/huge-cold-war-camera-with-100-inch-infrared-lens-takes-two-to-operate/
Harc a hadizsák- mányért…
(USA vs.
Szu.).
Sok új USA / Szu. fegyver
német alapokon…
71
Az eszközök fejlődése – (hideg)
háborúkon keresztül (Korea, Vietnam)
http://www.icollector.com/KOREAN-WAR-ERA-M1-CARBINE-INFRARED-SNIPER-SCOPE_i5326808 Még ma is
megvásárol- ható az interneten.
72
Az eszközök fejlődése – (hideg) háborúkon keresztül (pl. Irak)
http://www.wired.com/dangerroom/2013/04/darpa-infrared-cameras/
DARPA:
lásd még a robotkutyát
is…
Mai cél:
kisebb berendezés,
jobb felbontás.
73
Civil alkalmazások – hideg/meleg I.
http://www.newleafhomeenergy.com/services.htm
Energia- osztályba
sorolás:
hol szökik a hő…
74
Civil alkalmazások – hideg/meleg II.
http://coolcosmos.ipac.caltech.edu/image_galleries/ir_zoo/coldwarm.html
A fej leghidegebb
pontja:
fülünk.
(Égett ujj…)
Melegvérű ember
vs.
hidegvérű gekkó …
... vagy skorpió.
Kutyalihegés
= hőleadás.
(Bőrén nincsenek
pórusok.)
75
Civil alkalmazások – hideg/meleg III.
Törött középső ujj gyógyulása
http://infra.blog.hu/2008/01/19/gyogyulas_kovetese_a_szomatoinfra_berendezessel Szomato infra:
+ : gyulladás vagy több ér
(daganat) - : lipóma
76
Egér a Marsról I.
Golde T.E., Bacskai B.J.:
Amyloid deposits can be rapidly detected in the brains of living mice using a novel ligand and near-infrared fluorescence imaging.
Nat. Biotechnol.23(5), 552–554 (2005)
Sokszor csak a bonc- asztalon látjuk az Alzheimer-
kór állapotát.
Korai észlelés és terápia:
jobb esélyek.
NIR kamera segít.
Itt már aktív:
IR besu- gárzás, DE
roncsolás- mentes
77
Egér a Marsról II.
Hintersteiner M.et al.:
In vivo detection of amyloid-β deposits by near-infrared imaging using an oxazine-derivative probe.
Nat. Biotechnol.23(5), 577–583 (2005)
78
Szexálás I.
Sumriddetchkajorn S., Chakkrit Kamtongdee C.:
Optical penetration-based silkworm pupa gender sensor structure.
Appl. Optics51(4), 408–412 (2012)
Tenyésztés szempontjából
fontos, hogy mi van a bábban.
Bábot megbontani
nem lehet, mert akkor elpusztul…
79
Szexálás II.
Sumriddetchkajorn S., Chakkrit Kamtongdee C.:
Optical penetration-based silkworm pupa gender sensor structure.
Appl. Optics51(4), 408–412 (2012)
Nézzünk bele a NIR segítségével a
selyemhernyó bábjába!
80
Szexálás III.
Sumriddetchkajorn S., Chakkrit Kamtongdee C.:
Optical penetration-based silkworm pupa gender sensor structure.
Appl. Optics51(4), 408–412 (2012)
Lányoknál semmi extra …
… de a fiúknak világít a „farkuk”.
81
Pár/tíz mikrométeres nagyságrendek(től)
Látható kép: vizsgálandó terület megkeresése, majd (N)IR mérés
Nem, vagy csak kis mintaelőkészítést igényel: kevesebb hiba
Különböző mérési módok: heterogén minták könnyebb vizsgálata
Mikro/makroszkópos képalkotás I.
egy pont több pont terület
Meddig tart?
Más megoldás lehet jó…
(bemozdult fénykép)
82
Mikro/makroszkópos képalkotás II.
pont kép
83
Mikro/makroszkópos képalkotás III.
A 16 elemből álló detektorsor a mintát 100 µm × 6,25 µm vagy 400 µm × 25 µm blokkokban látja (NIR esetén, IR: 1,56 µm...)
10 lépés másodpercenként, avagy 170 spektrum egy másod-
perc alatt (16 cm -1 mellet)
84
FPA (Focal Plane Array)
Mikro/makroszkópos képalkotás IV.
videotelefon fejlesztése (AT&T): 1969!
Mikro/makroszkópos képalkotás V.
85 T (transz- misszió)
86
Mikro/makroszkópos képalkotás VI.
E
R
mintafelszín
E R
spekuláris reflexió
diffúz reflexió
gyengített teljes reflexió
(ATR)
R (reflexió)
mintafelszín mintafelszín
Mikro/makroszkópos képalkotás VII.
87
Cassegrain objektív
ATR kristály ÉS minta
elmozdulás (x,y)
31
Mikro/makroszkópos képalkotás VIII.
89
Technológia nyomon követése I.
bevonás
Maurer L., Leuenberger H.:
Terahertz pulsed imaging and near infrared imaging to monitor the coating process of pharmaceutical tablets.
International Journal of Pharmaceutics370(1-2), 8–16 (2009)
Képalkotás – tablettavizsgálatok
bevonás ideje
bevonat (Opadry Pink): idő előrehaladtával erősödő jel 1390 nm-en
korpusz: idő előrehaladtával gyengülő jel 2120 nm-en
90
Technológia nyomon követése II.
keverés
Eredetiségvizsgálat
Gendrin C. et al.:
Content uniformity of pharmaceutical solid dosage forms by near infrared hyperspectral imaging: A feasibility study.
Talanta73(4), 733–741 (2007)
Gendrin C. et al.:
Pharmaceutical applications of vibrational chemical imaging and chemometrics: A review.
Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis48(3), 533–553 (2008)
Képalkotás – tablettavizsgálatok
NIR VIS Hamis Eredeti
Pl. hamis Viagrában a
kék színt patkányméreg
adta.
Nem kell eltörni, a „NIR”
belelát.
(Megmarad a bizonyíték.)
91
Eredeti Hamis
Eredetiségvizsgálat vs. imaging:
makro (VIS)
Edzőteremben izomnövelő
helyett
„barkács cucc”.
92
Eredeti Hamis
Eredetiségvizsgálat vs. imaging:
makro (NIR)
PCA Abs.
Mátrixhatás.
93
• Képalkotás NIR tartományban:
nincs roncsolás
• 400 × 400 μm méretű mérési tartomány, 6,25 × 6,25 μm méretű képpontokkal
• 64 × 64 pont, azaz összesen 4096 pont, pontonként 128 spektrum átlagolásával
• Átlagos abszorbancia értékek alapján színezett ábrák
Technológiai probléma vs. imaging
Probléma a tabletta felületén:
mi az oka?
Spórolás miatt más alapanyag, bevonathiányt
okozott.
94
Hatóanyag R
2=0,88-0,96
Filmbevonat (Opadry®) R
2=0,41-0,54
Technológiai probléma vs. imaging:
korrelációs térképek (2D és 3D)
95
lószúnyog szárnya: 18,5 mm × 4,5 mm = 132 000 spektrum
Képes képtelenségek
ujjlenyomat: 20 mm × 13,5 mm = 450 000 spektrum
Anyagok azonosítása
(vegyszer, lőpor) az ujjlenyomaton.
Szerkezet, összetétel megállapítása
roncsolás nélkül.
96
A (N)IR módszerek, technológiák előnyei
Roncsolásmentes (fermentáció, anyagazonosítás, homogenitás, bevonat, hamisítás, visszáru, csomagolóanyag stb.)
Gyors (jelsorozatok (másod)perces nagyságrendben képezhetők)
Rengeteg rejtett információ megfejthető (adatbányászat, oknyo- mozások)
Gyors visszacsatolás a technológiába, minőségellenőrzésbe, mi- nőségbiztosításba
FDA „alternatív” módszere
Költséghatékony, nagy áteresztőképességű
Tudásintenzív módszerek
A nemtudása tudás tudásakezdete...
Köszönetnyilvánítás
Párta László
1, Ballagi András
1Kiss Violetta
2, Finta Zoltán
2Horgos József
3,4, Zelkó Romána
4Jekő József
5, Csorvássy István
5Lakatos László
6, Axel Rau
7Izsó Eszter
8, Tieger Eszter
8, Lőrincz Áron
8, Kontsek Endre
81
Richter Gedeon Nyrt.
2
sanofi-aventis Zrt.
3
Hungaropharma Zrt.
4
SE Egyetemi Gyógyszertár, Gyógyszerügyi Szervezési Intézet
5
Nyíregyházi Főiskola, Kémia Intézeti Tanszék / Alkaloida Vegyészeti Gyár Zrt.
6
PER-FORM Hungária Kft., Analitikai Divízió
7
PerkinElmer, Rodgau
8