S y m p o s i a B i o l o g i c a H u n g a r i c a S y m p o s i a B i o l o g i c a H u n g a r i c a
PHYSIOLOGIE
(BEWEGUNG)
DER SPERMIEN
PHYSIOLOGIE (BEWEGUNG) DER SPERMIEN
Symposion in Budapest, Oktober 1960
Herausgegeben von I. TÖRŐ
(Symposia Biologica Hungarica 4.)
D ie biologischen und praktischen Fra
gen der Spermienbewegung wurden von deutschen, italienischen, polnischen, tschechoslowakischen und ungarischen Forschem erörtert,. Die Vortrage be
fassen sich m it der Zusammensetzung der Spermien, m it ihrer Biochemie und Struktur sowie den Veränderun
gen, die in den Spermien infolge der hormonalen, neuralen und anderen Einflüsse entstehen. Fragen der Patho
logie der Spermien, der Bedeutung der Spermienbewegung in der foren
sischen Praxis sowie in der prakti
schen Tierzucht wurden ebenfalls be
sprochen.
VERLAG D E R UNGARISCHEN AKADEM IE
DER W ISSENSCHAFTEN BUDAPEST V.
ALKOTMÁNY UTCA 21
S y m p o s i a B i o l o g i c a
H u n g a r i c a
y m p o s i a o g i c a u n g a r i c a
R e d i g i t I . T Ö H Ő
R e d i g e n d a c u r a v i t M. M Ü L L E R
Vol. 4.
A K A D É M I A I K I A D Ó , B U D A P E S T 1 9 6 4
PHYSIOLOGIE (BEWEGUNG) DER SPERMIEN
Symposion in Budapest, Oktober 1960
IN H A L T
V o rw o rt ... 7 T e iln e h m e rv e rz e ic h n is ... 9
Hy n i e, J . : V e rä n d e ru n g e n d e r M o tilitä t d e r S p e rm ie n d u r c h e in ig e ä u ß e re u r.d in n e re E in flü s s e ... 11 G i ARO la, A .— Ba l l e r io, C.: A sp e c ts p a rtic u lie rs de la c y to d y n a m iq u e n ó m asp er-
m iq u e «in v i t r o » ... 17 Mé s z á r o s, I .: D ie S p e r m a q u a litä t b e e in trä c h tig e n d e ex o g en e u n d e n d o g e n e F a k
t o r e n ... 27 B rn v Á R i, R .: B e le b u n g sv e rsu c h e m it K o n d o m s p e r m a ... 31 Mil c o u, S. M .— Ma d e l e in e Ma ic a n e s c o—He l è n e Din u l e s c o: I m p o r ta n c e c lin iq u e
d e l ’é tu d e m o rp h o lo g iq u e d u sp e rm e e n r e la tio n a v e c le m é ta b o lis m e d u f r u c t o s e ... 35 Mo l n á r, J . : D e r F r u k to s e g e h a lt im S p e rm a p la s m a v o n N e k r o s p e r m ie n ... 45 Do e p f m e r, R .: D ie k lin is c h e B e d e u tu n g d e r A m in o s ä u re n im m e n s c h lic h e n E ja k u l a t 51 Kr a m p it z, G .: Ü b e r d ie c h ro m a to g ra p h is c h e B e s tim m u n g v o n A m in o s ä u re n im
m e n s c h lic h e n S p e r m a ... 59 Sa n d r it t e r, W .— Gr o s s e r, K . D .: Q u a n tita tiv e h is to c h e m isc h e U n te rs u c h u n g e n
a n S p e rm ie n ... 63 Be c z e, J . : Ü b e r d ie Z u s a m m e n h ä n g e zw isch en den. B e w e r tu n g s f a k to re n d es B u lle n
sa m e n s u n d d e r B e f r u c h t u n g ... 79 PÓSALAKY, Z .: H isto c h e m isc h e U n te rs u c h u n g e n d e r S p erm io g en ese ... 83 Ru c k t, T . : B e m e rk u n g e n ü b e r h isto c h e m isc h e u n d h o rm o n a le F r a g e n d e r S p e rm io
g en ese ... 89 Mo l n á r, J . : B e w e g u n g s v e rh ä ltn is se d e r S p e rm ie n a u s S p e rm a to z e le n ... 93
V O R W O R T
M it d e r E n tw ick lu n g d e r w issenschaftlichen F orsch u n g sm eth o d en w ird es im m er leichter, jen en A nsprüchen zu genügen, n ach w elchen die w issen
schaftliche F o rsch u n g gleichzeitig m it d er A nalyse g ru ndlegender biologischer F ra g e n a u c h die P ro b lem e d e r P ra x is löst. D ie F o rsch u n g d er Biologie u n d P ath o lo g ie d e r m ännlichen G eschlechtszellen h a t in d e r le tz te n Z eit einen großen A ufschw ung genom m en. A n d e r F o rsch u n g n ehm en Z ytologen, H isto- logen, E m bryologen, C hem iker, G enetiker, U rologen, T ie rä rz te usw. gleicher
m aß en teil, den n die biologischen E ig en sch a ften d e r m ännlichen G eschlechts
zellen sind fü r die F a c h m ä n n e r vieler D isziplinen von g rö ß tem In teresse. E s zeigte sich, d a ß d e r G ru n d fü r die U n fru c h tb a rk e it des M enschen m indestens so o ft die m ännlichen K eim zellen w aren, wie ein D efek t d er Eizellen. Bis vor ku rzem w u rd e n die m ännlichen K eim zellen n ic h t so gründlich u n te rsu c h t, wie die w eiblichen E izellen, wo die U n reg elm äß ig k eit d e r P e rio d iz itä t leicht b em erk b ar is t u n d die A u fm erk sam k eit a u f die eventuellen S tö ru n g en ric h te t.
A ußerdem is t die S perm atologie fü r die T ierz u ch t von g ro ß er B edeu tu n g , den n d u rc h die F o rsch u n g u n d K e n n tn is d er Sperm ien k a n n m an das M aterial fü r die k ü n stlich e B esam ung sichern.
Alle diese U m stä n d e tru g e n z u r E rh ö h u n g des In teresses bei u n d fü h rte n zum W unsch des A ustausches d er M einungen, w odurch die F o rsch u n g w eiteren A n trieb e rh alten k ö n n te. A u f G ru n d dieser E rw äg u n g fa n d es die U ngarische A kadem ie d e r W issenschaften fü r richtig, ein solches Sym posion zu o rg a n i
sieren, das den verschiedenen F ach leu te n , Ä rz ten u n d N ich t-Ä rzten G elegen
h e it gib t, ih re M einungen auszu tau sch en , u n d bei welchem die B eschäftigung m it einem stren g beg ren zten T h em a zum erfolgreichen F o rts c h ritt d e r F ra g e b e iträ g t. D ie B ew egung d er S perm ien u n d ih r Z u sam m enhang m it d e r eigen
a rtig e n S tru k tu r, m it dem besonderen u n d von dem an d e rer Zellen abw eichen
den C h a ra k te r d er Sperm ien, is t eine jen er F rag e n , welche in engem Z u sam m en h an g m it d er B estim m u n g d e r B efruchtungsm öglichkeit stehen. Dieses T h em a ist also ohne Zweifel eines von jenen, welche am m eisten In teresse b ea n sp ru ch e n können. D er B an d erscheint in d e r Serie »Symposia Biologica H ungarica« d e r U ngarischen A kadem ie d er W issenschaften. E s is t ä u ß e rs t zu b ed au ern , d aß es e rst n ach v ier J a h r e n in die H ä n d e d e r L eser gelangen k an n . D as E rscheinen w urde d u rc h den W unsch verzögert, au ch die D iskussion zu publizieren, was a b e r leider le tz te n E n d es n ic h t gelang. D as im B a n d e n th a lte n e M aterial ist jedoch noch h e u te ak tu ell u n d w enn a u c h das E ine o d er A ndere von d e r F o rsch u n g bereits ü b erh o lt ist, können im G runde diejenigen, die sich fü r das T h em a interessieren, die Seiten dieses W erkes m it N u tze n d u rc h b lä tte rn .
B u d ap est, 1. Septem ber, 1964
T E I L N E H M E R VE R Z E I C HNI S
A. Ba b ic s U ro lo g iseh e K lin ik , M ed izin isch e U n iv e r s itä t , B u d a p e s t C. Ba l l e r io P r im a riu s des I n s t i t u t e s « R egina E lena», M ilano J . Be c z e F o r s c h u n g s in s titu t f ü r T ie rz u c h t, B u d a p e s t
R . Bu d v á r i I n s t i t u t f ü r G e ric h tlic h e M edizin, M edizinische U n iv e r s itä t, P écs
R . Do e p f m e r U n iv e r s itä ts - H a u tk lin ik , B o n n
J . Hy n ie S ex o lo g isch es I n s t i t u t d e r K a r ls - U n iv e r s itä t, P ra g Ma d e l e in e Ma ic a n e s c o I n s t i t u t f ü r E n d o k rin o lo g ie »P rof. C. I . P a rh o n « , B u k a re s t I . Mé sz á r o s F o r s c h u n g s in s titu t f ü r T ie rz u c h t, B u d a p e s t
L . Mócsy H o c h sc h u le f ü r V e te rin ä rm e d iz in , B u d a p e s t
J . Mo l n á r U ro lo g iseh e K lin ik , M edizinische U n iv e r s itä t, B u d a p e s t Z. PÓSALAKY M o rp h o lo g isch e A b te ilu n g , I n s t i t u t f ü r E x p e rim e n te lle
M ed izin d e r U n g a ris c h e n A k a d e m ie d e r W is s e n s c h a fte n , B u d a p e s t
T . Ru c k i I. K lin ik f ü r G e b u rts - u n d F ra u e n h e ilk u n d e , M edizinische A k a d e m ie , P o z n a n u n d I n s t i t u t f ü r H isto lo g ie U nd E m b r y o logie, M edizinische A k a d e m ie , P o z n a n
W . Sa n d r it t e r P a th o lo g is c h e s I n s t i t u t d e r U n iv e r s itä t, G ieß en
I . T I n s t i t u t f ü r H is to lo g ie u n d E m b ry o lo g ie , M ed izin isch e
S ym p . Biol. H ung., 4, 11 — 15 (1964)
VERÄNDERUNGEN DER MOTILITÄT DER SPERM IEN DURCH EINIGE ÄUSSERE UND IN N ERE EINFLÜSSE
J . Hy n ie
SEXOLOGISCHES INSTITUT DER KARLS-UNIVERSITÄ T, PRAG
Z usam m enfassung
F ü r d a s S tu d iu m d e r B e w e g lic h k e its v e rä n d e ru n g e n d e r S p e rm ie n w u rd e v o n u n s e in e m o d ifiz ie rte M e th o d e n a c h Ba k e r u. M ita rb . a n g e w a n d t. H ie b e i w ird d ie Ü b e r tr itt s d a u e r v o n 100 S p e rm ie n ü b e r ein e G re n z lin ie zw isch en zw ei k le in e n Q u a d ra te n e in e r Z ä h lk a m m e r g e m essen u n d a u s d ie s e r bzw . d e r S p e rm ie n d ic h te ih r e m ittle r e G e sc h w in d ig k e it e rr e c h n e t. B ei m a n c h e n U n te rs u c h u n g e n g e n ü g t es, n u r d ie Ü b e r tr itt s d a u e r o d e r d e re n re z ip ro k e W e rte , d e n sog. P ro p u l- s iv itä ts in d e x z u v e rg le ic h e n .
A u f d iese W eise k o n n te n w ir fe s ts te lle n , d a ß b e i Z im m e rte m p e r a tu r die S p e rm ie n m o tilitä t n o c h 2 —4 S tu n d e n n a c h d e r m a k ro s k o p is c h e n V e rflü ssig u n g s te ig t u n d e r s t d a n n a b s in k t. N a c h V e rd ü n n u n g m it v e rs c h ie d e n e n iso to n isc h e n , n ic h t s tö r e n d e in g re ife n d e n F lü s s ig k e ite n w u rd e d ie M o tilitä t in d e n m e is te n F ä lle n e rh e b lic h g e s te ig e rt. W e ite r w u rd e d e r s tö re n d e E in flu ß d e r H y p o - u n d H y p e r to n ie sow ie d ie W irk u n g n ie d r ig e r bzw . h o h e r p H -W e rte s t u d ie r t . D a s E j a k u la t v e r t r ä g t b e i ru h ig e m K o n t a k t so g a r 1 5 % ig e H C l, d ie s p o n ta n n ic h t tie f e r e in d r in g t u n d im E ja k u l a tz e n t r u m d ie S p e rm ie n b e w e g lic h k e it n u r w en ig b e e in f l u ß t . N a c h D u rc h m is c h u n g g e h t d iese je d o c h — e b e n so w ie b e i q u a s i is o to n is c h e r H C l — s c h n e ll w ie d e r v e rlo re n . I n d e r le t z tg e n a n n t e n S ä u re b e w e g e n sic h die S p e rm ie n n a c h te ilw e is e r N e u tr a lis a tio n m it is o to n is c h e r N a 2H P 0 4 lä n g e re Z eit.
T o x isch e S u b s ta n z e n a u s T rich o m o n a s v a g in a lis -K x d tv u e n s e tz e n d ie S per- m ie n b e w e g lic h k e it h e ra b .
F ü r A n tik o n z e p tio n s m itte l b e s tim m te , k ü n s tlic h e to x is c h e S u b s ta n z e n s o llte n in is o to n isc h e n u n d te ilw e ise n e u tr a lis ie r te n L ö su n g e n a u f ih re S p erm izid en E ig e n s c h a fte n g e p r ü f t w e rd e n . B ei h a lb flü ss ig e n A n tik o n z e p tio n s m itte ln k ö n n e n w ir n ic h t m it ih r e m E in d rin g e n in d a s E ja k u l a t re c h n e n u n d m ü s se n d e s h a lb b e id e M ed ien k u r z v e rm isc h e n .
M it H ilfe d ie s e r M eth o d e k a n n m a n a u c h d ie W irk u n g in n e r e r, b e so n d e rs je d o c h h o rm o n a le r E in flü s s e a u f d ie S p e rm ie n b e w e g lic h k e it s tu d ie re n . Ü b e r d ie sb e z ü g lic h e d e fin itiv e R e s u lta te k ö n n e n w ir je d o c h einstw eilen, n ic h t b e ric h te n .
E inführung
In m einem k urzen R e fe ra t m öchte ich besonders ü b e r die E rfassungs- m öglichkeiten von B ew eglichkeitsveränderungen d e r Sperm ien b eric h ten u n d hiebei b etonen, d aß eine o b jek tiv e U n tersu ch u n g sm eth o d e d e r S perm atozoen- m o tilitä t m eh r aussagen k an n , als die bloße A ngabe des P ro ze n tsa tz es m obiler Sperm ien bzw. die su b je k tiv e S ch ätzu n g d er M o tilitätsstu fen . A us vielen, b ereits vorliegenden g u te n o b jek tiv en M ethoden w äh lte ich jene, die einfach u n d w enig ansp ru ch sv o ll is t u n d so m it leich t bei experim en tellen U n te r suchungen u n d in d e r ärztlic h en P ra x is a n g e w a n d t w erden k a n n . A uch sollte sie m eh r als n u r die B ew eglichkeit einzelner Sperm ien au sdrücken.
A us diesem G ru n d e en tsch ied ich m ich fü r die M ethode d e r S perm ien g esc h w in d ig k eitsu n tersu ch u n g bei S tieren n ach Ba k e r, Cr a g l e, Sa l is b u r y
u n d v a n De m a e k, die jedoch fü r die ä rztlic h e P ra x is m o d ifiz ie rt u n d v e re in fa c h t w erden m u ß te.
M ethodik
W ir beo b ach ten das v erflü ssig te, u n v e rd ü n n te m enschliche S perm a bei Z im m e rte m p e ra tu r in ein er Z äh lk a m m er u n d ac h te n d arau f, wie bew egliche S perm ien in zwei angren zen d en kleinen Q u a d raten die G renzlinie in beiden R ic h tu n g e n d u rc h tre te n ; m it ein er S to p p u h r w ird die Z eit b estim m t, die 100 Sperm ien benötigen, u m diese G renzlinie zu d u rchkreuzen. A us dieser Z eit u n d d e r D u rc h trittsö ffn u n g , die von d e r L än g e d e r G renzlinie u n d d er Tiefe d e r Z äh lk am m er ab h ä n g ig ist, können w ir fü r eine b estim m te Z ahl von Sperm ien in 1 cm 3 d eren m ittle re G eschw indigkeit berechnen. D ie G renzlinie m iß t regel
m äß ig 0,05 m m , die Tiefe d e r Z äh lk a m m er 0,10 m m , 0,05 m m o d er 0,02 m m . D ie le tz te seich te ste K a m m e r eig n et sich am besten, is t jedoch selten er im H a n d el. F ü r Z äh lk a m m ern von 0,05 m m Tiefe k a n n die B erech n u n g d er m ittle re n S perm iengeschw indigkeit n ac h folgender F o rm el d u rc h g e fü h rt w erden :
N---60
sin 45° 1 0 0 -1 ,4 0 -6 0 3360000 3360 56 /',
1 spz/m m 3 ■ / sp zm • t spzm
400
c — m ittle re G eschw indigkeit in M inuten d — S perm atozoen in m m 3
q — Q u ersch n itt d e r D u rc h trittsö ffn u n g
t — Z eit des D u rc h tritte s von 100 spz(N ) in sec T Z eit in M inuten
spzm — M illionen von Sperm ien in 1 cm 3
60 ^ , . . . ,
--- P ro p u lsiv ita ts in d e x T tl sec
F ü r den D u r c h tr itt u n d die e rreich te E n tfe rn u n g von 1 m m e in e r b e stim m te n S perm ienzahl in 1 m m 3 d u rc h die l x l m m m essende Ö ffnung m uß eine b e stim m te Z eit v o ra u sg esetzt w erden, w enn m an eine geradlinige u n d gleiche B ew egungsrichtung an n im m t. Bei einer kleineren Ö ffnung w ird d e m n ac h n u r eine klein ere Z ahl von S perm ien den gleichen W eg z u rü c k legen. Die so gew onnenen D a te n erm öglichen also die P ro p u lsiv itä tsb e re c h - nu n g einer gerad lin ig en B ew egung. D a sich jedoch die S perm ien in v e r
schiedenen R ich tu n g en bew egen, verw enden w ir bei d e r B erechnung d er w irk lichen m ittle re n P ro p u lsiv itä t, die g rö ß er is t als dem Ü b e r tr itt e n ts p ric h t, einen K o rre k tio n fa k to r, d. h., w ir d iv id ie ren diese d u rc h den Sinus von 45°.
U m die P p-P rozente d e r P ro p u ls iv itä t zu bestim m en, g e n ü g t es bei ein er k o n sta n te n S perm ienzahl die D u rc h tritts z e it von 100 S perm ien zu vergleichen.
S onst b ed e u te n reziproke W erte d er D u rc h tritts z e it einen w ichtigen B e u rte i
lu n g sfa k to r des E ja k u la te s, den w ir P ro p u lsiv itä ts in d e x , P t nennen. D e r P ro p u lsiv ita tsin d e x b e stim m t den W e rt des E ja k u la te s au sg e d rü ck t d u rc h
d - q - t
12
die S p erm iendichte u n d -m o tilitä t, d. h. gleichzeitig d u rc h zwei F a k to re n , die sich in b e stim m te r Weise ergänzen können. B ei q u a lita tiv h erv o rrag en d em E ja k u la t b e trä g t P, beiläu fig 1,0 —0,5, bei noch g u tem E ja k u la t P ; — 0,50 bis 0,20.
W enn w ir eine Z äh lk am m er von 0,02 m m Tiefe b en ü tze n , n ehm en w ir fü r B erechnung des P, die D u rc h tritts z e it von 40 Sperm ien.
A nw endung der M ethode
Motilitätsveränderungen der Spermatozoen nach der Ejakulation M it dieser M ethode k ö n n ten w ir zeigen, d aß die P ro p u ls iv itä t d e r S per
m ien n ach erfo lg te r m akroskopischer K o lliq u atio n noch einige S tu n d e n w äch st o d er sch w a n k t u n d e rst d an n allm ählich a b sin k t (Tab. 1).
D ie P ro p u ls iv itä t in 10 beliebig ausgew ählten E ja k u la te n stellte sich in P ro p u lsiv itä tsp ro z e n te n au sg e d rü ck t wie fo lg t d a r: n ach K o lliq u a tio n 100% , n ach 1 w eiteren S tu n d e 125% , n ach 2 l/ 2 S tu n d e n 113% , n ach 4 S tu n d e n 106% . Solch feine U n tersch ied e k a n n m an bei bloß su b je k tiv e r S ch ätzu n g b eg reif
licherw eise n ic h t feststellen.
Also die m ittle re P ro p u ls iv itä t d er Sperm ien w ächst bei Z im m e rte m p e ra t u r noch einige S tu n d e n n ac h d e r V erflüssigung.
Tabelle 1
E jakulat — 5,8 cm3 m it 172 M il/cm3
Unmittelbar Nach
40'
Nach 1 Std. 40'
Nach 3 Std.
Nach 4 Std.
R ein n ach V erflüssigung
t p p
8 6 "
100%
81"
106%
71"
121%
80"
107%
77"
111%
M it physiol.
NaCl-Lösung 0,3 : 0,1
t
p p 72"
119%
69"
125%
75"
115%
92"
93%
76"
113%
V erdünnt 0,2 : 0,2
t
P p
74"
116%
81"
106%
83"
104%
103"
83%
158"
54%
V erd ü n n t 0,1 : 0,3
t p p
94"
91%
100"
8 6 %
106"
81%
153"
56%
181"
47%
t — D u rc h trittsz e it
P p — P rozente der P ro p u lsiv itä t
Die Verdünnung des Ejakulates
B ei V erd ü n n u n g des E ja k u la te s m it n ic h t sch äd ig en d en isotonischen L ösungen stieg die D urchgangszeit ein er b estim m te n S perm ienm enge n ic h t p ro p o rtio n a l m it dem G rade d e r V erdünnung, sondern w esentlich langsam er;
also die B ew eglichkeit d er S perm ien is t g rö ß er gew orden (Tab. 1). So e rreich te z. B. die m ittle re G eschw indigkeit bei ein er V e rd ü n n u n g m it isotonischer K ochsalzlösung im V erh ältn is 1 : 3 sogar 300% des A usgangsw ertes, a b e r san k d a n n schneller.
Verschiedene Lösungsmittel regen n a tü rlic h die B ew eglichkeit d e r S perm ien in versch ied en er W eise an . Von den C hloriden d e r K a tio n e n N a ', K ', C a--, M g" is t dies besonders das MgCl2 (M agnesium chlorid). K a lziu m freie R inger- L ösung b ew äh rte sich u n s u n te r m eh reren zu sam m engesetzten k ü n stlic h e n L ö su n g sm itteln besonders g u t. Z u r N e u tra lisa tio n von S äuren leistete uns das isotonische bibasische N a triu m p h o sp h a t (N a2H P 0 4) seh r g u te D ien ste. N ach M ischung m it isotonischen Salz-, Essig-, M ilch- u n d Z itronensäurelösungen h ö rte die B ew eglichkeit d e r Sperm ien rasch auf, blieb jedoch bei teilw eiser N e u tra lisa tio n m it 1—3 T eilen isotonischer Na d t PO, noch lange erh alten , w enn d as p H bis e tw a zu 5 anstieg. D as p H ist w ich tig er als die Z u sam m en setzu n g d e r S äure. D ie B o rsäu re b ra u c h te n ic h t so v iel Z usatz. B ei bloßem K o n ta k t des E ja k u la te s m it den an g e fü h rten Säuren d ra n g en jedoch dieselben n ic h t allzuschnell in die E ja k u la tm a sse ein u n d deshalb blieb die B ew eg
lich k eit h in te r d e r G renzschicht fa st u n v e rä n d e rt. A uch 15% Salzsäure d rin g t bei bloßer A nlagerung n ic h t schnell in die E ja k u la tm a sse ein u n d erzeu g t a u f ih re r O berfläche eine sch ü tzen d e Schicht. B ei D u rch m isch u n g t ö t e t jedoch eine solch k o n z e n trie rte Salzsäure die S perm ien sofort. In solcher W eise m üssen w ir die A ngaben in d er L ite r a tu r versteh en , d aß die Sperm ien sta rk e HCl besser v e rtra g e n als schw ache. A uch isotonische K a lilau g e u n d N a tro n la u g e v e rh a lte n sich ähnlich.
Gleichfalls hypotonische Lösungen wie z. B. d estilliertes W asser u n d hypertonische L ösungen v e rh a lte n sich bei einfacher Z ugabe o d er n ac h d er M ischung in äh n lich er W eise. N ach D urch m isch u n g m it U berschuß d e r s ta rk hypo to n isch en o d er h y p erto n isch e n F lü ssig k eit schw indet die B ew eglichkeit se h r schnell.
Kolloidstoffe wie z. B. G um m i acaciae o d er a g a r können in isotonischen L ösu n g en gelöst, die B ew eglichkeit in gew isser, jedoch n ic h t allzu au sd ru c k s
voller W eise hem m en. A u f d e r an d e ren Seite können K olloidstoffe die stö ren d e W irk u n g sch ä d ig e n d er Ionen b eschränken.
D ie Isotonie u n d N e u tra lisa tio n spielen bei d e r P rü fu n g toxischer W irk
stoffe eine w ichtige R olle, besonders a b e r solcher, die z u r A n tik o n zep tio n v e rw e n d e t w erden sollen. M anche geläu fig als to x isch angesehenen M itte l ze ig te n sich in iso tonischer L ösung u n d bei n ic h t zu hohem o der niedrigem p H eig en tlich wenig toxisch.
B ei d er P rü fu n g halb flü ssig er Antikonzeptionsmittel (der A n tik o n zep tio n s
gelee) rechnen w ir d a m it, d aß sie ohne das W irken ein er d r itte n K ra ft, in d e r R eg el n u r schw er in das E ja k u la t ein d rin g en . W ir verm ischen sie deshalb m it dem E ja k u la t u n te r B e n ü tz u n g eines G lasstäbchens von ca. 6 m m D u rc h m esser, das in ein er E p ro u v e tte von 8 m m W eite n u r einm al g e d re h t w ird.
A u f diese A rt v ersu ch ten w ir die sub coitum s ta ttfin d e n d e leichte D u rchm ischung n ach zu ah m en .
M it H ilfe d e r oben an g e fü h rte n M ethode p rü fte n w ir au ch Toxine von Mikroorganismen, besonders die des Trichomonas vaginalis. D e r N äh rb o d en C PLM (Z ystein-P epton-L eber-M altose m it K anin ch en seru m , P en icillin u n d S trep to m y cin ) v e rrin g e rte die P ro p u ls iv itä t im V ergleich zu kalzium freiem R in g er a u f 77% , die T richom onas v a g in a lis-K u ltu r aus gleichem N äh rb o d en
14
a u f 56% , u n d z e rq u etsch te T richom onas v ag in alis-K u ltu re n m it E n d o x in en bis a u f 3 4% . Solche U n tersch ied e k a n n m an bei su b je k tiv e r B eo b ac h tu n g n ic h t au sreich en d b ew erten.
B esprechung
W ie erw äh n t, k a n n die O rig in alm eth o d e von Ba k e r u n d M itarb . fü r die a n g e fü h rte klinische u n d experim en telle P ra x is n ic h t b e n ü tz t w erden.
Als erheblicher S tö ru n g sfak to r fü r die B e u rte ilu n g d er S perm ienbew eglichkeit sei besonders die V e rd ü n n u n g e rw ä h n t. W e ite r b ra u c h t m an n ic h t im m er die m ittle re P ro p u ls iv itä t berechnen, u n d es g e n ü g t sehr o ft n u r d e r V ergleich d e r D urchgangszeiten, P ro z e n t d e r P ro p u ls iv itä t (Pp).
Ic h h ab e v ersu ch t m it dieser M ethode auch die V erän d eru n g en d e r S p er
m ienbew eglichkeit d u rc h innere E inflüsse u n d besonders die W irkung d e r H o rm o n th e ra p ie zu verfolgen. Ic h h ab e besonders die T h erap ie m it kleinen D osen von A ndrogenen gleichzeitig m it sehr kleinen Ö strogendosen in 14tägigen S tößen p ro b ie rt. D a ich b isher n ic h t genug F älle (34) u n d n ic h t fü r genug lange Z e it beo b ach ten k o n n te, sei hier n u r v o rläu fig e rw äh n t, d aß sich bei m anchen P a tie n te n die Q u a litä t bzw. die M o tilitä t des schw achen S perm as n ac h dieser von He r o l d in au g u rie rte n M ethode besserte.
G em äß d e r an unserem I n s titu t von Ra b o c hu n d Ho m o lk abei v ersch ie
denen histologischen H o d e n ty p e n d u rc h g efü h rte n E ja k u la tm e n g e n u n d P h o sp h a ta se n stu d ie n sch e in t n ic h t n u r das T esto stero n aus L eydigschen Zellen, sondern noch ein a n d e re r te s tik u lä re r W irk sto ff u n d w ahrscheinlich au ch das h y p o p h y säre P ro la k tin an d e r Sperm iogenese u n d B ew eglichkeit m aß g eb lich b e te ilig t zu sein.
L IT E R A T U R
Ba k e r, F . N ., Or a c l e, R . G ., Sa l is b u r y, G . W ., v a r De m a r k, N . L . (1957), S p e rm a - to z o a n v e lo c itie s in v itr o . F e rtil. a n d S te r il., 8, 149.
________
S ym p . Biol. H ung., 4, 17—25 (1964)
ASPECTS PARTICULIERS DE LA CYTODYNAMIQUE NÉMASPERMIQUE «IN VITRO»
A. Gia r o l a e t C. Ba l l b r io IN ST IT U T «REGINA ELEN A », M ILANO
R ésum é
L ’é tu d e c y to - d y n a m iq u e d es s p e rm a to z o ïd e s «in v itro » m o n tr e q u e l’a p p o r t e x p é rim e n ta l de c e rta in e s so lu tio n s s p e rm io -iso to n iq u e s d u ty p e d e la so lu tio n d e R in g e r- p h o s p h a te s à u n p H d e 7,4, e n tr a în e u n e a c ti v a ti o n b io c h im iq u e d es cellu les sé m in a le s e t u n e a u g m e n ta tio n n o ta b le de le u r s u r v ie (ju s q u ’à 180 h e u re s à u n e te m p é r a t u r e c o n s ta n te de 20 d e g ré s C elsius, a v e c u n e s u r v ie m o y e n n e de 120 h e u re s ). Ces v a le u rs n e su b is s e n t p r a t iq u e m e n t a u c u n c h a n g e m e n t a p rè s a d d itio n d ’a u tr e s s u b s ta n c e s à d es c o n c e n tra tio n s d o n n é e s (a c id e s a m in é s, a n t i b io tiq u e s , v ita m in e s ).
Ces r é s u lta ts e x p é rim e n ta u x s o n t a p p lic a b le s en c lin iq u e d a n s c e r ta in s c as b ie n d é te rm in é s .
Introduction
A v a n t de vous p a rle r de c e rta in s asp ects p artic u liers de la c y to d y n a m iq u e n ém asp erm iq u e «in vitro» fo rm a n t le b u t de n o tre b re f exposé, je v o u d ra is o u v rir une p a ra n th è se su r les deu x lim ita tio n s fo n dam entales qui ré g n e n t encore d a n s le dom aine de ces recherches, e t qui tro p so u v e n t p ro v o q u e n t des e rre u rs d ’in te r p r é ta tio n .
T o u t d ’abord, les connaissances im p arfa ite s que nous avons encore s u r l ’actio n im m é d ia te e t m é d ia te des solutions com m uném ent em ployées p o u r m a in te n ir e t stim u ler le m o u v em en t cellulaire, ou p o u r le réveiller, s ’il é ta it assoupi, e t ensu ite l’im précise év a lu a tio n m écanique de la cin étiq u e n é m a sperm ique.
L ’opinion des d iffé ren ts chercheurs n ’est pas à ce s u je t u n an im e; les u ns l ’a ttr ib u e n t à l’influence h um orale du m ilieu, c’e st à d ire à la co n cen tratio n h y d rogénionique e t à l ’ac tio n des ions su r les élém ents co n tractiles de la queue du sperm atozoïde ou à la présence de c a rb o h y d ra te s glycolysables; d ’a u tre s l’a ttr ib u e n t à la conform ation a sy m é triq u e de la queue e t à la présence, ainsi q u ’à la p o sitio n de ce que l ’on appelle la g o u tte p ro to p la sm a tiq u e ; d ’a u tre s en fin l ’a ttr ib u e n t à la co n tra ctio n e t à la d éc o n tractio n d u fila m e n t axile.
V oilà pourquoi, d an s la p ra tiq u e , lorsque nous considérons le ty p e , le degré, la q u alité, la durée e t la v a rié té du m o uvem ent, nous pouv o n s m êm e n o u s éloigner de nos conceptions.
C’est à ces asp ects que nous lim ito n s l ’év a lu a tio n de la d y n am iq u e ném asp erm iq u e, car nous estim ons en d é fin itiv e q u ’ils p e u v e n t réellem en t ré su m e r le problèm e to u t en tier.
E n ce qu i concerne le ty p e , nous ten o n s u n iq u e m e n t co m p te d a n s nos rech erch es des tro is v a rié té s de m ouvem ent:
1° mouvement de propulsion (celui d an s lequel les queues dessinent 2
a lte rn a tiv e m e n t, d a n s u n sens ou d an s l ’a u tre , des courbes latérales avec le d ép lac em en t en a v a n t qui en d ériv e );
2° mouvement latéral ou ondulatoire (p ar des dép lacem en ts len ts e t la té ra u x d e la queue, e t p arfois p a r des séries de v ib ra tio n s su r les d ifféren ts p lan s ou m êm e p a r des secousses p ro v o q u a n t des su rsa u ts plus ou m oins vifs).
C ette a ttitu d e ex p rim e to u jo u rs une v ita lité ré d u ite ou des conditions d ’a m biance défavorables, m ais elle p e u t égalem ent faire p ré v o ir un rév eil im m in en t de l’é t a t d y n a m iq u e ju s q u ’alors assoupi, com m e d a n s le cas de la conservation
«a frigore»;
3° mouvements rotatoires (avec des d éplacem ents de com pensation in loco, su r un d ia m è tre plus ou m oins ré d u it e t à u n e v itesse v aria b le, ce qui ex p rim e des co n d itio n s v ita le s défavorables irréversibles).
N ous évaluons en p o u rcen tag es le degré d u m o u vem ent, é t a n t donné que l’a p p ré c ia tio n e st plus ou m oins favorable, en raison d u fa it q u ’u n e a c tiv ité énergique e t v iv e p ré v a u t su r les a u tre s ty p e s de m ouvem ents (oscillatoire- ro ta to ire ), que d an s le dom aine ex p é rim e n ta l nous g roupons sous l’ap p e lla tio n de «m ouvem ents non progressifs».
L a q u alité du m o u v em en t d o it ê tre considérée a fin de rech erch er les influences plus ou m oins effectives des m om ents physico-chim iques (en p a r t i culier m écaniques), alors que p o u r la d iv e rsité du m o u v em en t on d e v ra tâ c h e r de sav o ir si celle-ci e st sp o n tan ée ou provoquée.
On d o it e n fin concevoir la durée d u m o u v em en t, p a r l ’in te rm é d ia ire d ’exam ens ré p é té s to u te s les 12 heures ju s q u ’à l’épuisem en t to ta l de to u te a c tiv ité cinétique, com m e une su rv iv an c e exprim ée aussi bien p a r la to ta lité des h eures à m o u v em en t p ro g ressif que p a r u n in d ice de su rv iv an c e qui tie n t com pte égalem ent des v a ria tio n s des p o u rcen tag es e n tre une o b serv atio n e t l ’a u tre .
M éthodes
D a n s n o s e x p é rie n c e s n o u s a v o n s e x a m in é l a su rv iv a n c e in v itro ,* so u s u n e t e m p é r a t u r e c o n s ta n te d e + 2 0 ° d u sp e rm e n a tu r e l e t d u sp e rm e a d d itio n n é , d a n s la p r o p o r ti o n de 1 à 10, de s é r u m h o m o lo g u e, s é ru m h é té ro lo g u e , s o lu tio n s sa lin e s e t g lu c o s a lin e s à p H v a ria b le * * (s o lu tio n sa lin e R in g e r- b ic a r b o n a te , so lu tio n g lu c o s a lin e R in g e r-b ic a r- b o n a te , s o lu tio n g lu c o s a lin e m a g n é s iq u e , so lu tio n g lu c o sa lin e g é la tin é e ) e t à p H c o n s ta n t (s o lu tio n g lu c o s a lin e R in g e r- p h o s p h a te , so lu tio n g lu c o sa lin e ty p e B a k e r), a v e c l ’a d jo n c ti o n e x p é rim e n ta le d ’u n e d ilu tio n a p p ro p rié e , d ’a m in o -a c id e s, d ’a n tib io tiq u e s , de s u lfa m id e s e t d e v ita m in e s .
* g _ 1 a ih ~k a 2 ^2 a 3 ^3 ~b » • ■ • a n-2tn-2 a n-1 ^n-1 ~f~ a n^n
Uj, a 2, o 3. . . . an_2, a n ,, a n = a c t i v i t é c in é tiq u e e x p rim é e p a r la m é th o d e d e s dixièm es, t2 t3 . . . . tn _ 2 tn_l tn = f r a c t i o n s de te m p s e n tr e 2 o b s e r v a tio n s su ccessiv es p e n d a n t
le s q u e lle s o n a tt r i b u e u n e a c ti v it é c o n s ta n te a u sp e rm e .
** S o lu t. sa lin es et glucosalines à p H variable : A) S o lu t. sa lin e R in g e r-b ic a rb . (p H = 6,0)
S o lu t. R in g e r - N a H C 0 3 2 ,S x I O"2 m o le /litre
N a C l so lu t. 0,154 M cc 100,0
KC1 ” 0,154 M ” 2,0
C aC l, (a n h y d re ) ” 0,110 M ” 2,0
N a H C 0 3 ” 0,154 M ” 20,0
B) S o lu t. g lu c o s a h n e R in g e r- b ic a r b . (p H = 6,0)
S o lu t. R in g e r - N a H C 0 3 2 ,5 x Í0 -2 m o le /litre , lé v u lo se 0 ,2 %
N a C l so lu t. 0,154 M cc 100,0
KC1 ” 0,154 M ” 2,0
C aC l2 (a n h y d re ) ” 0,110 M ” 2,0
1 8
N a H C O j s o lu t. 0,154 M co 20,0
lé v u lo se (M erck) 10% ,, 2,5
C) S o lu t. g lu c o s a lin e m a g n é s iq u e (p H = 6,2)
N a C l so lu t. 0,154 M cc 100,0
KC1 „ 0,154 M „ 4,0
C aCl2 (a n h y d re ) ,, 0,110 M ,, 3,0
N a H C O j " „ 0,154 M „ 21,0
MgSO 4 • 7 H 20 „ 0,154 M „ 1,0
lé v u lo se (M erck) 10% ,, 2,6
D ) S o lu t. g lu c o s a lin e g é la tin é e (p H = 5,8)
N a C l g r 0,900
KC1 0,018
C aCl2 (a n h y d re ) 0,200
P e p to n e W itte 1,250
g é la tin e 1,250
lé v u lo se (M erck) 2,500
H 20 d is tillé e cc 100,00
E ) S o lu t. sa lin e e t g lu c o s a lin e à p H c o n s ta n te S o lu t. g lu c o sa lin e R in g e r- p h o s p h a te (p H = 7,4)
N a C l so lu t. 0,154 M cc 100,0
KC1 „ 0,154 M 2,0
C aCl2 (a n h y d re ) ,, 0,110 M 2,0
N aH C O ., „ 0,154 M 20,0
ta m p o n p h o s p h . 0,109 M1 10,0
lé v u lo se (M erck) 10% 2,7
F ) S o lu t. g lu c o s a lin e t y p e B a k e r (p H = 7,6)
N a C l g r 0,20
N a , H P 0 4 0,60
K H 2P 0 4 0,01
lé v u lo se (M erck) 3,00
H 20 d is tillé e cc 100,00
1 N a 2H P 0 4 g r 1,268 — N a H 2P 0 4 g r 0,243 — H 20 d is tillé e cc 1000,0
R ésu ltat et discussion
C om me solution sperm ioisotonique a y a n t u n e d urée de su rv iv an c e m oyenne de 120 heures, la solution glucosaline R in g er-p h o sp h a te s ’e st dém o n trée v ra im e n t idéale; ensu ite la solution glucosaline m agnésique (environ 120 heures) e t enfin les solutions glucosalines ty p e B ak er e tR in g e r-b ic a rb o n a te (108 heures).
E n ce qu i concerne les te m p s les plus longs, nous avons o b te n u le classem ent su iv a n t: solu tio n glucosaline R in g er-p h o sp h ates e t ty p e B ak er (180 heures), solution glucosaline R in g er-b ic arh o n ate (168 heures), solu tio n m agnésique (144 heures) e t enfin solu tio n saline R in g er-b ic arb o n ate (132 heures).
M alheureusem ent le peu de tem p s que nous avons à n o tre disposition ne nous p e rm e t p as d ’ex a m in e r les p a rtic u la rité s parfois trè s in tére ssa n tes des ré su lta ts ex p é rim en tau x que nous avons recueillis. N ous pouv o n s seulem ent d ire que l ’ad jo n ctio n ex p é rim en tale d ’am ino-acides s’e st dém o n trée, p a r o rd re d écroissant, plus favo rab le p o u r l’arginine (0,1), la glycocolle (0,1) e t la I-lysine (0,1) avec des valeurs m oyennes a lla n t de 110 à 105 heures, e t des valeurs m ax im a a lla n t de 144 à 120 heures.
L ’ad jo n c tio n d ’an tib io tiq u e s a d onné les ré su lta ts rép résen tés d an s ta b le a u 2.
D a n s l’ensem ble p o u r év alu er l’influence su r la c y to d y n am iq u e ném a- sperm ique in v itro de l’a d jo n ctio n ex p érim en tale de quelques solutions sperm io- isotoniques e t de certain es substan ces a d d itiv es (am ino-acides, an tib io tiq u e s,
Tableau 1
Effet des solutions différentes
Sperme naturel et additionné 1 :10 avec solutions Cas Durée de survivance Indice de survivance spermioisotoniques, sérum homologue et hétérologue N° moyen
ne minima maxima moyen
ne minima maxima
Sperm e in tég ral ... 18 62 36 96 2,60 1,20 3,60
© S o lu t.salin e R inger-bicarbonate (A) 8 90 48 132 3,38 1,72 5,04
3
o S o lu t. glucosaline Ringer-
©
> bicarb o n ate ... (B) 18 108 48 168 3,86 1,72 5,56
*© S o lu t. glucosaline m agnésique. (C) 12 120 72 144 4,28 3,04 5,52
O S o lu t. glucosaline g é la tin é e ... (D) 8 95 72 120 3,34 2,12 4,56
S o lu t. glucosaline R inger-
ci ph o sp h ate ... (E) 18 120 72 180 5,72 3,56 7,72
au S o lu t. glucosaline B aker . . . . (F) 18 108 18 180 4,32 1,72 6,52
Cu Sérum hétérologue ( c o b a y e ) ... 12 61 36 84 2,50 1,06 3,98
Sérum hom ologue (R h positif) . . . 12 64 36 96 2,64 1,20 4,08
vitam in es), n o u s nous ra p p o rto n s a u x d u rées de su rv iv an c e du sperm e n a tu re l conservé dan s les m êm es con d itio n s ex p é rim en tales (durée m oyenne de 62 heures, avec u n m ax im u m de 96 heures).
N ous co n sta to n s alors que les sim ples ad jo n ctio n s de solution glu cosaline R in g er-p h o sp h a te s o n t p erm is de p o rte r les m oyennes à 120 h eures e t les plus longues à 180 heures; de m êm e que p a r l’ad jo n ctio n de d ih y d ro stre p to m y c in e (0,05), de n iacin e (0,01) e t d ’arg in in e (0,1) on a o b te n u des d u rées m oyennes a lla n t de 110 à 120 heures; p a r l ’ad jo n c tio n de tro is a n tib io tiq u e s (tetracy clin e, te rra m y c in e e t auréom ycine) de la p y rid o x in e e t de l’arg in in e a u x durées
m a x im a de 144 à 168 heures.
Nos ré s u lta ts nous a m è n e n t donc à conclure que l’ad jo n ctio n ap p ro p riée de ce rtain es solutions sp erm ioisotoniques a c tiv e le biochim ism e de la cellule n ém asp erm iq u e e t a u g m en te co n sid érab lem en t la d u ré e de su rv iv an c e, m êm e si la dern ière a d d itio n d ’a u tre s su b stan ce s te n d à d im in u e r to u t au m oins p a rtie lle m e n t ces effets, m ais de telle façon c e p e n d a n t à ne ja m a is com pro
m e ttre leurs p o ssibilités d ’em ploi clinique si l’on en c o n state l ’o p p o rtu n ité . L e ré s u lta t p ré c é d e n t d e v ie n t encore plus é v id e n t si l’on se ra p p o rte à l’in d ice de su rv iv an c e (qui tie n t égalem ent co m p te du d egré cinétique).
N ous o b tenons ain si les ind ices m oyens su iv a n ts: solution R in g e r-p h o s p h a te : 5,72; ty p e B ak er: 4,32; glucosaline m agnésique: 4,28; glucosaline R in g er- b ic a rb o n a te : 3,86; saline R in g e r-b ic a rb o n a te : 3,38. Com me indices m ax im a:
solu tio n R in g er-p h o sp h a te s: 7,72; ty p e B ak er: 6,52; glucosaline R in g er- b ic a rb o n a te : 5,56; glucosaline m agnésique: 5,52; saline R in g er-b ic arb o n ate : 5,04.
L ’a d jo n ctio n ex p é rim e n ta le d ’am inoacides (tab l. 2) donne les valeurs m oyennes su iv a n te s: p o u r l’arg in in e 0,1 : 110 heures; p o u r la glycocolle 0,1 e t la lysine 0,1 : 105 heures; p o u r l ’arginine 0,05 e t glycocolle 0,01: 102 heures. P o u r les v aleu rs m ax im a: p o u r L -arginine 0,1: 144 heures; p o u r glyco
colle 0,1, L -arg in in e 0,05 e t 0,01, L -lysine 0,1: 120 heures.
20
Tableau 2 Eff et des aminoacides
Sperme additionné 1 : 10 avec solations glucosaline, Ringer-phosphates aminoacides
Dilu
tion Cas
N°
Durée de survivance Indices de survivance moyen
ne minima maxima moyen
ne minima maxima
Glycocolle ... 0 ,1 18 10 5 7 2 12 0 3 ,9 1 3 ,4 0 5 ,6 5
0 ,0 1 1 8 102 72 1 0 8 3 ,5 0 3 ,1 5 5 ,3 2
m s-A lanine ... 0 ,1 12 9 8 2 4 1 0 8 2 ,9 5 0 ,8 6 5 ,5 0
0 ,0 1 12 6 5 2 4 12 0 2 ,8 2 0 ,8 6 5 ,6 3
Acide am inobutyrique ... 0 ,1 8 2 4 12 72 1 ,6 5 0 ,4 5 3 ,1 2
0 ,0 1 8 2 6 2 4 72 1 ,7 8 0 ,8 7 3 ,4 8
m s-Thréonine ... 0 ,1 12 6 8 24 1 0 8 2 ,3 8 0 ,8 6 3 ,8 5
0 ,0 1 12 8 6 4 8 1 0 8 2 ,8 9 1 ,7 2 3 ,9 0
m s -V a lin e ... 0 ,1 18 7 8 4 8 10 8 2 ,7 0 1 ,7 5 3 ,6 8
0 ,0 1 18 9 5 72 10 8 3 ,7 0 3 ,0 9 3 ,8 0
m s-N orvaline ... 0 ,1 12 2 4 12 72 1 ,6 4 0 ,4 0 3 ,1 0
0 ,0 1 12 2 6 2 4 72 1 ,7 5 0 ,8 4 3 ,5 0
m s-Leucine ... 0 ,1 12 4 6 2 4 8 4 2 ,1 0 0 ,8 5 3 ,4 8
0 ,0 1 12 4 2 2 4 72 1 ,0 6 0 ,7 9 3 ,0 2
m s-Isoleueine ... 0 ,1 12 4 6 2 4 72 2 ,0 5 0 ,9 4 3 ,4 6
0 ,0 1 12 4 6 2 4 72 2 ,0 2 0 ,9 0 3 ,2 8
m s -N o rle u c in e ... 0 ,1 12 5 0 24 72 2 ,0 9 0 ,8 0 3 ,2 5
0 ,0 1 12 5 2 24 72 1 ,9 8 0 ,8 6 3 ,1 1
m s -S é rin e ... 0 .1 18 75 4 8 1 0 8 2 ,9 0 1 ,6 1 3 ,8 5
0 ,0 1 18 7 5 4 8 10 8 2 ,7 7 1 ,6 5 3 ,8 0
L - O r n ith in e ... 0 ,1 18 18 12 7 2 1 ,0 2 0 ,3 5 3 ,4 6
0 ,0 1 18 2 6 24 72 1 ,7 8 0 ,8 4 3 ,5 0
L -A rg in in e ... 0 ,1 18 11 0 72 144 3 ,8 5 3 ,4 0 5 ,9 5
0 ,0 5 1 8 10 2 7 2 1 2 0 3 ,5 2 3 ,0 4 5 ,6 4
0 ,0 1 12 1 0 0 7 2 1 2 0 3 ,5 0 3 ,1 0 5 ,6 0
0 ,0 0 5 12 1 0 0 7 2 1 0 8 3 ,4 5 2 ,8 5 5 ,4 5
m s-C itrulline ... 0 ,1 8 70 3 6 1 0 8 2 ,6 6 1 ,2 0 3 ,8 2
0 ,0 1 8 68 3 6 1 0 8 2 ,3 2 1 ,1 8 3 ,6 5
L-Lysine ... 0 ,1 12 10 5 72 1 2 0 3 ,7 5 2 ,9 8 5 ,7 0
0 ,0 1 12 1 0 0 6 0 1 0 8 3 ,4 8 2 ,9 5 5 ,4 1
A cide-L -aspartique ... 0 ,1 8 78 4 8 1 0 8 2 ,7 0 1 ,6 5 3 ,9 1
0 ,0 1 8 85 60 1 0 8 3 ,5 0 3 ,0 5 3 ,9 4
A c id e -L -g lu ta m iq u e ... 0 ,1 8 4 6 2 4 7 2 2 ,3 5 0 ,8 6 3 ,5 8
0 ,0 1 8 4 6 2 4 7 2 2 ,0 5 0 ,8 5 3 ,4 5
A cid e-L -o x y g lu tam iq u e... 0 ,1 8 4 6 2 4 72 2 ,0 5 0 ,8 2 3 ,4 6
0 ,0 1 8 4 6 2 4 7 2 2 ,3 0 0 ,8 6 3 ,5 8
L -C y s té in e ... 0 ,1 1 2 4 6 2 4 8 4 2 ,0 6 0 ,8 0 4 ,4 8
0 ,0 1 12 4 6 2 4 4 8 1 ,7 4 0 ,8 8 1 ,8 5
J
Sperme additionné 1 : 10 avec solutions glucosaline, Ringer-phosphates, aminoacides Dilu
tion Cas
N°
Durée de survivance Indices de survivance moyen
ne minima maxima moyen
ne minima maxima
m s-M éthionm e ... 0,1 12 42 24 72 2,02 0,86 3,40
0,01 12 46 24 48 1,74 0,86 1,80
m s-P hénilalanine ... 0,1 8 42 24 72 2,10 0,88 3,41
0,01 8 32 24 48 1,02 0,50 1,68
m s -T ry p to p h a n e ... 0,1 8 32 12 48 1,12 0,65 1,65
0,01 8 42 12 72 2,06 0,85 3,22
L -H istidine ... 0,1 18 78 24 108 2,85 1,70 3,84
0,01 18 94 48 108 3,50 3,02 3,82
L -Proline ... 0,1 8 65 72 108 2,32 1,20 3,80
0,01 8 70 36 108 2,64 1,22 3,75
L -O xyproline ... 0,1 12 46 36 48 1,74 0,88 2,02
0,01 12 42 24 72 1,08 0,85 2,96
N ous ré fé ra n t à l ’in d ice de su rv iv an c e, nous avons com m e valeurs m oyennes: glycocolle 0,1: 3,91; L -arg in in e 0,1: 3,85; L -lysine 0,1: 3,75; m s- v alin e 0,01: 3,70; L -arg in in e 0,05: 3,52. E t com m e v aleu rs m ax im a: L -arg in in e 0,1: 5,95; L -lysine 0,1: 5,70; glycocolle 0,1: 5,65; L -arg in in e 0,05: 5,64; m s- ala n in e 0,01: 5,63.
L ’ad jo n c tio n d ’a n tib io tiq u e s (tabl. 3) a donné les ré s u lta ts su iv an ts:
com m e valeurs m oyennes la d ih y d ro stre p to m y c in e base 0,05: 120 heures;
le chloroam phénicol sim ple 0,05: 110 heures; la pénicilline G -potassique e t so d iq u e 0,315, la té tra c y c lin e ch lo rh y d ra te 0,005 e t la te rra m y c in e 0,0025:
107 heures. Comme v aleu rs m ax im a: la té tra c y lin e 0,005, la te rra m y c in e 0,0025 e t l’auréom ycine 0,005: 168 heures; la d ih y d ro stre p to m y c in e 0,05 e t la pénicilline 0,315: 156 heures.
Les indices de su rv iv an c e d o n n e n t com m e valeurs m oyennes p o u r la d ih y d ro stre p to m y c in e 0,05: 4,25; p o u r la pénicilline 0,315: 3,90; p o u r l’a u ré o m ycine 0,005: 3,84; p o u r la té tra c y c lin e 0,005: 3,80; p o u r le chloroam phénicol 0,05: 3,78. Les v aleu rs m a x im a so n t: p o u r la pénicilline 0,315: 5,85; p o u r l ’auréom ycine 0,005: 5,78; p o u r la d ih y d ro stre p to m y c in e 0,05: 5,75; p o u r la té tra c y c lin e 0,005: 5,70; p o u r la stre p to m y c in e base 0,05: 5,62.
L es v ita m in e s (tabl. 4) o n t donné les valeurs m oyennes su iv an tes: p o u r la n iacine 0,01: 112 h eures e t 0,1: 105 heures; p o u r l’acide ascorbique 0,001:
99 heures; p o u r la p y rid o x in e 0 ,l: 98 heures; p o u r l ’acide p a n to th é n iq u e 0,0001 : 86 heures. Les tem p s m ax im a sont: p o u r la p y rid o x in e 0,1: 168 heures; p o u r la n iacine 0,1 e t0 ,0 1 ; p o u r l ’acide ascorbique 0,01 e t 0,0001: 120 heures. Comme ind ices de su rv iv an c e m oyens p o u r la niacine 0,01: 4,62 e t 0,1: 3,84; p o u r l ’acide ascorbique 0,001: 3,68; p o u r la p y rid o x in e 0,1: 3,65. Les m a x im a so n t:
p o u r la p y rid o x in e 0,1: 6,52; p o u r la n iacine 0,01: 5,82 e t 0,1: 5,70; p o u r l ’acid e ascorbique 0,0001: 5,61 e t 0,01: 3,92.
P o u r év a lu e r d an s l ’ensem ble l ’influence su r la cy to d y n a m iq u e ném a- sp erm iq u e in v itro de l’a d d itio n ex p é rim en tale d e ce rtain es solutions sperm io-
22
Tableau 3
Effet des antibiotiques ou sulfam ides
Sperme additionné à solution
Dilution Cas Durée de survivance Indices de survivance
glucosaline Ringer-phosphates N ° moyen-
maxima moyen-
e t antibiotiques ou sulfamides ne minima ne minima maxima
Pénicilline G-potassi- 0,630% 12 105 48 120 3,50 2,35 5,65
que e t sodique (1000 U.O/cc)
0,315% 12 107 48 156 3,80 1,85 5,85
(500 U.O/cc)
D ihydrostreptom ycine 0,05% 12 120 72 156 4,25 3,30 5,75
base (sulfate) (500 gr/cc)
0,01% 12 102 72 120 3,50 3,24 5,14
(100 gr/cc)
Streptom ycine base 0,05% 12 103 60 144 3,70 2,78 5,62
(500 gr/cc)
0,01% 12 101 72 120 3,45 3,18 5,18
(500 gr/cc)
C hloroam phénicol 0,05% 12 110 72 144 3,78 2,98 5,41
(500 gr/cc)
0,01% 12 100 72 120 3,25 2,75 5,10
(100 gr/cc)
T étracycline 0,005% 12 107 48 168 3,80 1,65 5,70
(chlorhydrate) (50 gr/cc)
0,0025% 12 100 48 120 3,36 1,75 5,24
(25 gr/cc)
Terram ycine (oxitétra- 0,005% 12 105 48 120 3,55 2,25 5,35
cycline chlorhydrate) (50 gr/cc)
0,0025% 12 107 48 168 3,74 2,05 5,60
(25 gr/cc)
A uréom ycine (chlor- 0,005% 12 106 48 168 3,84 2,18 5,78
tétracy clin e chlor- (50 gr/cc)
h y d rate) 0,0025% 12 100 48 120 3,50 2,40 5,20
(25 gr/cc)
É rythrom ycine 0,005% 12 105 48 120 3,22 2,25 5,05
(50 mg/cc)
0,0025% 12 100 48 108 2,74 1,65 3,95
(25 mg/cc)
B acitracine 0,005% 12 105 48 120 3,18 2,17 4,98
(50 gr/cc)
0,0025% 12 100 48 108 2,92 1,75 4,05
(25 gr/cc)
Trisulfam ides (sulfadia- 0,5% 12 85 60 108 2,05 1,75 3,25
zine, sulfam erazine, (0,003 gr/cc) sulfam étazine)
0,1% 12 100 48 120 2,80 1,60 4,05
(0,001 gr/cc)
