•Mit jelent az, hogy spektroszkópia ? •R •M Mit jelent az, hogy NMR spektroszkópia ?•Mit jelent az, hogy NMR ? •N

Mit jelent az, hogy NMR spektroszkópia

?

• Mit jelent az, hogy NMR ?

• N

• M

• R

• Mit jelent az, hogy spektroszkópia

?

http://tonga.usp.edu/gmoyna Spektrum = színkép ?

Az anyag (minta, vizsgált molekula) és az elektromágneses sugárzás kölcsönhatását vizsgáljuk.

Kölcsönhatás leggyakoribb formája : abszorpció Az elektromágneses sugárzás tipusai :

10^-10 10^-8 10^-6 10^-4 10^-2 10⁰ 10² hullámhossz ( cm)

-sugár Röntgen UV VIS IR -hullám radio

A molekulák (elemi részecskék) nem vehetnek fel tetszőleges energiaállapotot. (Kvantumelmélet)

Magasabb frekvencia – nagyobb energia

Hullámhossz-energia : fordított arányú összefüggés. A hullámhossz/frekvencia függvényében minőségileg más – más tipusú kölcsönhatások jönnek létre, más jellegű belső energiák változnak meg. :

„Kvantumlétra.”

/Röntgen-sugárzás – belső héj elektronjai, magenergiák

UV/VIS – vegyérték(kötő)elektronok

IR – rezgési energiák(kötéshossz/kötésszög) NMR – Magspin energiák

E = h 

E = h 

E



Az NMR Az NMR spektroszkópia jelentősége spektroszkópia jelentősége

• Szerkezeti kémia

• Szerves kémia: Minőségi analízis. Új vegyületek

szerkezetvizsgálata. Enantiomer tisztaság vizsgálata.

• Természetes vegyületek szerkezetvizsgálata..

• Metabolitok vizsgálata

• Fizikai-kémiai vizsgálatok

• Gazda-vendég kölcsönhatások.

• Reakciókinetika

• Makromolekulák háromdimenziós szerkezete

• Peptidek, fehérjék, enzimek

• DNS/RNS, DNS/RNS komplexek

• Poliszaharidok

• Gyógyszerkutatás

• Receptor kötődési vizsgálatok

• Orvostudomány: diagnosztika

Magnetic Resonance Imaging (MRI)

Elméleti alapok

Az atommagok egy makroszkópikusan nehezen értelmezhető sajátsággal, un. spinnel rendelkeznek Az NMR spektroszkópia számára csak azok az atommagok érdekesek,

ahol a spinkvantumszám (I)



Az atommagok csoportositása :

Páros tömegszám és rendszám  I = 0 (¹²C, ¹⁶O) Páros tömegszám és páratlan rendszám

 I = egész szám (¹⁴N, ²H, ¹⁰B)

Páratlan tömegszám  I = 1/2, 3/2, 5/2…stb (¹H, ¹³C, ¹⁵N, ³¹P)

Másik lehetséges csoportositás NMR

szempontból: természetes előfordulás szerint Egy mag lehetséges spinállapotai (m)

m neve: mágneses kvantumszám

m = I, (I - 1), (I - 2), … , -I

m = I, (I - 1), (I - 2), … , -I

A legfontosabb (és általunk tárgyalt ) magok (¹H, ¹³C,

15N, ³¹P) esetén I = ¹/₂, tehát

Ennek eredményeképpen csak két energiaszintet kell figyelembe vennünk

Az atommagok további fontos paramétere az un.

mágneses momentum (), amelyet kifejezhetünk:

Ez egy vektormennyiség, amely megadja a mag által reprezentált „elemi mágnes” irányát és nagyságát, ahol

h a Planck konstans

 a giromágneses állandó, amely függ a mag anyagi minőségétől.

Minden egyes mag mágneses momentuma

(és természetesen giromágneses állandója) különböző.

m =

/

, -

/

m =

/

, -

/

 =  I h / 2

 =  I h / 2

Egy spin energiája egy polarizáló külső mágneses térben ( B_o, ) a tér nagyságától és a mágneses momentumtól (függ.

A külső B_o tér bekapcsolásakor a spinek energiája felhasad.

Két energiaszint lép fel, a külső térrel paralell és antiparallel állapot. Az energia a két vektor szorzataként írható le a követ- kezőképpen

Az energiakülönbség a két nívó,

 és , között

Az energiakülönbség a polarizáló B_o, tértől függ. A nivók.

benépesítettsége E függvénye, amit egy Boltzmann tipusú eloszlásból kiszámíthatunk

 A E ¹H esetén 400 MHz-en (B_o = 9.4 T) 4 x 10^-5 Kcal / mol.

B_o  B_o 

E = - ^ B_o E = - ^ B_o

E_ = - 

h

h

E =  h B

/ 2

E =  h B

/ 2

N

/ N

= e

N

/ N

= e

N

/ N

NMR mérés érzékenysége

Az érzékenységet befolyásoló tényezők:

- Giromágneses tényező ³.(



mágneses fluxusa)

- Természetes előfordulás

13C mérés 64-szer érzéketlenebb a giromágneses tényező értéke miatt

Amennyiben a temészetes előfordulást ¹³C (~1%) is számbavesszük, 6400 –szer kevésbé érzékeny

A rezonancia-frekvencia az energiakülönbség értékéből számítható:



E = h 



E =  h B

/ 2

Az ¹H magokra a jelenleg forgalmazott mágnesek (2.35 – 23.49 T) esetén a rezonanciafrekvencia 100 MHz és 1.00 GHz közötti érték.



C = 6,728



H = 26,753



=  B

/ 2



=  B

/ 2

Néhány fontos NMR- aktív mag

Név Spin Termész etes előfordul

ás (%)

Relatív érzéke

nység

Larmor frekvencia

11.7 T térerő esetén

(MHz)

1H 1/2 99.98 1 500.13

13C 1/2 1.07 1.76*10^-4 125.75

2H 1 0.015 1.45*10^-6 76.77

31P 1/2 100 6.6*10^-2 161.97

23Na 3/2 100 9.25*10^-2 132.29

19F 1/2 100 8.22*10^-1 470.59

10B 3 19.58 3.89*10^-3 53.73

11B 3/2 8.42 1.33*10^-1 160.46

14N 1 99.63 1.00*10^-3 36.14

15N 1/2 0.37 3.85*10^-6 50,69

17O 5/2 0.037 1.08*10^-5 67.80

29Si 1/2 4.7 3.68*10^-4 99.36

195Pt 1/2 33.8 3.36*10-³ 107,51









=2





=  B

A precesszió magyarázata : minden mag (mágneses és nem-mágneses) rendelkezik szögmomentummal ((L)

A magokat mint kis mágneseket képzeljük el, melyek tengelyük körül forognak

A mágneses momentum vektorokra két erő hat a polarizáló mágneses térben

- B_o, kényszeríti a térirányba történő beállást - igyekeznek megtartani a szögmomentumot

B_o

_o



L



L

Eredő mágnesezettség Eredő mágnesezettség

•A mintát alkotó elemi mágneses momentumok a B₀

bekapcsolása után rendezettséget mutatnak. Ennek eredménye az eredő mágnesezettség megjelenése, melyet egy

koordinátarendszerben ábrázolva érthetünk meg

• Ha felbontjuk a  vektort a z and <xy>,komponensekre

M_o

y

x

z

x y

z

B_o

B_o A mágneses térrel parallel és antiparallel beállású vektorok aránya N_ / N_.

x y

=

=

“0”

z z

Az eredő mágnesezettség a B_o irányába mutat, ezt hasznosítjuk az NMR -benl

A mágnesezettség M mágnesezettség

észlelése xy síkban észlelése xy síkban

• A B₁ oszcilláló mágneses tér kikapcsolása után az M_xy

vektor vissza fog térni a z tengely irányába ( egyensúlyi M_o,) és visszaáll az eredeti spineloszlás (N_ / N_ )

relaxáció

• M_xy vektor visszatérése z tengely irányába: precesszió az <xy> sikban

• Az M_xy vektor oszcillációja egy változó mágneses teret jelent, amely egy tekercsben áramot indukál:

z

x

M_xy

y

z

x

y

Vevőtekercs (x)

M_o

 NMR jel

egyensúly.

_o

z

x

M_xy

y

_o B_o

NMR NMR jel észlelése jel észlelése

• A B₀ tér bekapcsolása (illetve a minta mágneses térbe való helyezése) még nem eredményez NMR jelet, csak a nívók (egyébként nem észlelhető) felhasadását

• A mintának energiát kell abszorbeálni. Az energiát egy oszcilláló elektromágneses sugárzással tudjuk biztosítani.

( B₁ tér bekapcsolása)

M_o

z

x

i

B₁ = C * cos (_ot)

B₁

adótekercs (y)

y B_o

B₁ kikapcsolva M_o

z

x

B₁

z

x

M_xy

y y

_o

_o

B_o B_o

NMR NMR spektrométer spektrométer

• Az NMR spektrométer alapvetően egy nagy és drága FM rádió.

• Mágnes- Ma döntően szupravezető mágnesek.

• Frekvenciagenerátor – Előállítja az _o frekvenciát, amely a B₁ teret indukálja. CW és pulzustechnika.

• Detektor - érzékeli a mágnesezettséget az <xy>síkban

• Recorder - XY plotter, oszcilloszkóp, számítógép, stb

É D

B_o

B₁

Detektor Frekvencia

generátor

Rekorder

Mágnes

NMR NMR spektrométerek egykor és ma spektrométerek egykor és ma

Kémiai eltolódás Kémiai eltolódás

• Ha minden magnak egy jellemző _o Larmor freknciája van egy adott mágneses térben, mire jó az NMR spektroszkópia?

• Minden egyes mag megérzi azt a kémiai környezetet, amely befolyásolja a körülötte kialakuló effektív mágneses teret, mely a polarizáló és a helyi mágneses tér együttes hatására alakul ki körülötte

B_eff = B_o - B_loc --- B_eff = B_o( 1 -  )

 neve : mágneses árnyékolás. A mágneses árnyékolást befolyásolja a szomszédos magok, csoportok jelenléte, az elektronfelhő, azaz a molekulában levő kötések, hibridállapot stb.

Ennek alapján az etanol spektrumának így kellene kinézni:

H ^O-C H

^-C H

_o

low field

high

field

J. T. Arnold, S. S. Dharmatti, M. E. Packard, J. Chem.

Phys. 1951, 19, 507

Az etanol spektruma (kisérleti eredmény)

BME, 1995

Kémiai eltolódás skála

Kémiai eltolódás skála ( (   , ppm) , ppm)

• Lehetne frekvencia skálát is alkalmazni. Nehézkes, mivel B_loc isokkal kisebb, mint B_o, a számláló viszonylag kicsil (néhány száz Hz), míg a nevező nagy (száz MHz).

• Egy relatiív skálát használunk, minden jelet egy belső standard vegyület bizonyos jeléhez vonatkoztatva,.

• A skála előnye, hogy minden műszeren mért eredmény összehasonlítható.

• Általános belső standard a tetrametilszilán (TMS), mivel oldható a legtöbb

oldószerben, semleges, könnyen eltávolítható és 12 ekvivalens ¹H és 4 ekvivalens ¹³C atomot tartalmaz

H3C Si CH3 CH3

CH3

 = ppm (parts per million) _ref

Kémiai eltolódás skálák Kémiai eltolódás skálák

• ¹H, ~ 15 ppm:

• ¹³C, ~ 220 ppm:

0 TMS

ppm 2

10 7 5

15

Alifás H Alkoholok, ketonok 

protonjai Olefinek

Aromás H Amidok Sav OH

Aldehidek

ppm 50

150 100 80

210

Alifás CH₃, CH₂, CH

Heteroatomhoz kapcsolódó C Olefinek

Aromás C, konjugált alkének

C=O savak, aldehidek, észterek

0 TMS C=O

ketonok

Felix Bloch

Edward Purcell