Escherichia coli baktérium
és géntechnológiai alkalmazási lehetőségei
Készítette: Tóth Gergely
Jellemzése
Fakultatív anaerob, Gram-negatív, spórátlan pálca,
thermotoleráns, coliform enterobaktérium, ostorokkal és pílusokkal rendelkezhet
Laktóz-fermentációnál sav és gáz képződik
A mikrobiális genetika kedvelt modellje, és az egyik legszélesebb körben tanulmányozott baktérium Elsősorban nem patogén, de vannak patogén törzsei
(O157:H7)
Emlősök bélcsatornájában a normál flóra tagja Közegészségügyi indikátor, élelmiszer-vizsgálatok (fekáliás szennyeződés kimutatása, 1882 óta) Ismert a genomjának teljes bázissorrendje
kb. 3 MB genom (cirkuláris, kétszálú DNS)
Több plazmidja is lehet (3-20 kB, cirkuláris DNS)
Sejtalkotók
Miért ilyen kedvelt tesztorganizmus az E. coli?
• Haploid életciklus
• Gyors szaporodás (ideális körülmények között:
20 percenként osztódik) – pár napos genetikai kísérletek
• Kevés génnel rendelkezik az emberi DNS-el szemben
• Nincsenek intronok, felesleges bázisszekvenciák
• A T4-fág és –fág fertőzni tudják (klónozó vektorok lehetnek)
Escherichia coli géntechnológiai alkalmazása
• A belőle kinyert restrikciós endonukleázokkal DNS- hasítás
(pl. EcoRI-nél GAATTC palindrom szekvenciánál)
• EcoRI linkerek + EcoRI DNS gyűrűvé zárása
• Genetikai betegségek kimutatása molekuláris technikával
• Plazmid-kinyerése és transzformálása gazdasejtbe
• E. coli K12 felhasználása fág gének finom-szerkezeti térképezésére
• Gén-térképezés megszakított konjugációval
• Fehérjék, prohormonok extracelluláris termeltetése
Legújabb kutatások
• Nehézfém megkötésére alkalmas petidek
gyártása, valamint bioakkumuláció szennyezett területen
• Tetrahydrobiopterin (BH4) gyártás
• Etanol gyártás (Zymomonas mobilis enzimek beültetésével)
